웨스턴 블롯, ELISA용 항-Mesothelin 토끼 폴리클론항체 - Q13421

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Mesothelin 기능 및 위치

• Mesothelin은 MSLN 유전자에 의해 암호화되며, 전구체 단백질로 생산되어 두 가지 생성물인 거대핵세포-강화 인자(MPF)와 성숙한 막 결합 mesothelin으로 절단됩니다.
• 막에 고정된 mesothelin은 세포 접착에 역할을 할 수 있으며, 세포-세포 또는 세포-기질 상호작용에 관여할 가능성이 있습니다.
• 거대핵세포-강화 인자(MPF)는 시험관 내에서 거대핵세포 집락 형성을 강화할 수 있는 사이토카인으로 작용하여, 조혈작용에서의 역할을 시사합니다.
• 이 단백질은 GPI-앵커를 통해 세포막에 국한되며, 골지체와 절단 및 방출 후 분비 형태에서도 발견됩니다.
• Mesothelin은 흉막, 복막, 심낭을 덮고 있는 중피 세포에서 발현됩니다; 폐, 심장, 태반, 신장에서는 더 낮은 수준으로 발현됩니다.
• 이는 중피종, 난소암 및 일부 편평 세포 암종에서 매우 과발현되어 유용한 종양 표지자 및 치료 표적이 됩니다.
• 번역 후 변형에는 이황화 결합 형성, N-연결 당화 및 GPI-앵커 부착이 포함되며, 이는 안정성 및 막 결합에 중요합니다.
• 대체 스플라이싱, 인산화 및 단백질 분해적 절단 사건들은 그 다중 기능적 형태 및 세포 내 분포를 조절합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 Mesothelin의 세포외 도메인(aa 296–606)에 해당하며, 마우스에서도 보존되어(교차 반응성 기반) WB 및 ELISA에서 인간 및 마우스 샘플 검출 모두에 적합합니다.
• 웨스턴 블롯팅의 경우, 전장 전구체(~69 kDa)가 절단되므로 샘플에 따라 여러 밴드(예: ~40 kDa 성숙 mesothelin 및 ~31 kDa MPF)가 관찰될 수 있습니다. 재조합 단백질 또는 고발현 세포주(예: 난소암주 OVCAR-3 또는 중피종주)의 세포 용해물로 검증하십시오.
• ELISA에서 이 항체는 포획 또는 검출 시약으로 사용될 수 있습니다; 최적의 코팅 농도 및 검출 항체와의 페어링은 경험적으로 결정해야 하며, 이상적으로는 재조합 Mesothelin을 표준물질로 사용하는 것이 좋습니다.
• 폴리클론항체로서, 배치 간 변동성이 있을 수 있습니다; 반응성 및 특이성을 확인하기 위해 항상 양성 및 음성 대조군으로 파일럿 테스트를 수행하십시오.
• 혈청 또는 세포 배양 상등액에 존재하는 내인성 가용성 MPF가 검출될 수 있음을 고려하십시오; 배경을 줄이기 위해 차단 및 세척 조건을 이에 맞게 조정하십시오.

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