Anti-Mouse CD45 Monoclonal Antibody () for IF/ICC, FC - P06800

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CD45 기능 및 국재화

• CD45는 백혈구 공통 항원(L-CA), Ly-5, T200로도 알려져 있으며, 마우스에서 Ptprc 유전자에 의해 암호화되는 수용체형 티로신-단백질 인산화효소 C입니다.
• T 세포 활성화에 필수적이며, 항원 수용체 결합 시 CD45는 DPP4 결합을 통해 공동 활성화를 양성적으로 조절합니다.
• 이 단백질은 두 개의 인접한 세포 내 인산화효소 도메인을 포함하며, 첫 번째 도메인은 촉매 활성을 가지고 두 번째 도메인은 기질 특이성을 조절합니다(유사성에 의함).
• CD45는 SKAP1, FYN 및 LYN을 포함한 주요 신호 분자를 인산화 제거하여 LYN 활성과 하류 TCR 신호를 조절합니다.
• 면역 시냅스에서 CD45는 막 라프트(membrane rafts)에 국재되며 수지상 세포의 CLEC10A와 상호작용하여 자가면역을 예방하기 위해 T 세포 활성화 임계값을 미세 조정합니다.
• 대체 스플라이싱으로 인해 다양한 CD45 이소형이 존재하며, 분자량은 130에서 144 kDa 사이입니다. 이 단백질은 과도하게 글리코실화 및 인산화되어 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역형광(IF/ICC)의 경우: 고정 및 투과화 조건은 에피토프 접근성에 영향을 줄 수 있으므로, 메탄올과 파라포름알데히드 고정 프로토콜을 비교 테스트해 보십시오.
• 면역원은 세포 외 도메인의 상당 부분(aa 26–566)을 포괄하므로 여러 CD45 이소형을 인식할 가능성이 시사됩니다. 필요한 경우 실험 환경에서 이소형 특이성을 검증하십시오.
• 유세포 분석(FC)의 경우: 최적의 염색 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(titrate)하고, 적절한 아이소타입 대조군을 항상 포함하십시오.
• CD45는 모든 백혈구에 널리 발현되므로, 림프 조직에서 광범위한 염색이 예상되며 정확한 세포 집단 게이팅(gating)을 위해 계통 특이적 마커를 사용하십시오.

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