WB, IF, IHC, ELISA용 Anti-Neurofilament L 단일클론 항체 - P07196

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Neurofilament Light 폴리펩타이드 기능 및 국재화

• Neurofilament light 폴리펩타이드(NEFL)는 중간 필라멘트(intermediate filament) 패밀리의 구성원이며, NEFM 및 NEFH를 포함하는 세 가지 주요 뉴로필라멘트 단백질 중 하나로, 함께 뉴런의 직경과 축삭 구조를 유지합니다.
• NEFL은 페리페린(peripherin, PRPH) 및 알파-인터넥신(alpha-internexin, INA)과 같은 다른 뉴런 중간 필라멘트 단백질과 협력하여 뉴런의 무결성에 필수적인 섬유상 네트워크를 형성합니다.
• 이 단백질은 주로 축삭(axons)에서 발현되며 뉴런 세포의 세포질과 세포골격에 위치하여 축삭의 반경 성장에 중요한 역할을 합니다.
• 아세틸화, 글리케이션, 메틸화, 인산화, 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 필라멘트 조립, 안정성 및 다른 세포골격 구성 요소와의 상호작용을 조절합니다.
• NEFL 유전자의 돌연변은 샤르코-마리-투스병(Charcot-Marie-Tooth disease) 1F형 및 2E형을 포함한 신경 퇴행성 장애와 연결되어 있으며, 이는 축삭 유지 및 신경병증에 대한 민감성에서의 역할을 강조합니다.
• 이 단백질의 분자량은 약 61.5 kDa(서열 기준 계산)이며, 번역 후 변형으로 인해 SDS-PAGE에서 종종 68 kDa 밴드로 검출됩니다.
• NEFL는 다른 뉴로필라멘트 서브유닛과 함께 다발성 경화증, 알츠하이머병 및 외상성 뇌 손상과 같은 상태에서 뉴런 손상의 바이오마커로 사용됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원이 인간 NEFL 단백질의 중앙 영역인 아미노산 60-250에 해당하므로, 이 항체는 보존된 에피토프를 인식할 가능성이 높습니다. 비인간 종에 사용할 때 반응성을 확인하기 위해 서열 정렬을 고려하십시오.
• 웨스턴 블랏(Western blot)의 경우 68 kDa 근처의 밴드가 관찰될 수 있습니다. 예상 분자량과 비교하고 β-actin 또는 GAPDH와 같은 적절한 로딩 컨트롤을 사용하여 검증하십시오.
• 면역형광법(Immunofluorescence)의 경우 최적의 고정 및 투과화 조건을 테스트해야 합니다. 파라포름알데히드 고정 후 Triton X-100 투과화는 뉴로필라멘트 염색에 일반적으로 사용됩니다.
• 면역조직화학(Immunohistochemistry)의 경우 항원 회수 방법(예: 열 매개 시트르산 버퍼)이 검출을 향상시킬 수 있습니다. 양성 및 음성 조직 대조군을 포함하십시오.
• ELISA에서 항체를 사용할 때, 다른 뉴로필라멘트 서브유닛과의 교차 반응을 피하기 위해 코팅 항원이 면역원 영역과 일치하는지 확인하십시오.

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