WB, IHC-P, IP, ELISA, CHIP용 Anti-NFKB1 단일클론 항체 - P19838

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NF-kB 기능 및 위치

• NF-κB는 거의 모든 세포 유형에 존재하는 다능성 전사 인자로, 다양한 자극에 의해 촉발되는 신호 전달 계단의 종점 역할을 하며 염증, 면역, 분화, 세포 성장, 종양 형성 및 세포사멸과 같은 과정을 조절합니다.
• NF-κB는 RELA/p65, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL, NFKB2/p52 등을 포함하는 Rel-유사 도메인 단백질들로 형성된 동종 또는 이종 이량체 복합체로 기능합니다; p65-p50 이종 이량체가 가장 풍부한 형태입니다.
• NFKB1은 105 kDa 전구체(p105)를 암호화하며, 이는 공동 번역적 프로테아좀 매개 처리 과정을 거쳐 활성 50 kDa DNA 결합 소단위체(p50)를 생성합니다. 관련 참고문헌: PMID:1423592
• p50 소단위체는 RELA/p65와 결합하여 NF-κB p65-p50 이종 이량체를 형성하며, 이는 면역 반응 및 급성기 반응 유전자의 인핸서 영역에 있는 합의 κB 부위 5′-GGRNNYYCC-3′에 결합합니다. 관련 참고문헌: PMID:1740106, PMID:7830764
• p65-p50 및 RelB-p50 이종 이량체는 전사 활성제로 작용하는 반면, p50-p50 동종 이량체는 억제제로 기능하지만 BCL3와 결합 시 활성제로 전환될 수 있습니다.
• NFKB1/p105는 또한 관련 NF-κB 단백질에 대한 세포질 유지 분자 역할을 하여 이를 세포질 내에서 비활성 상태로 유지합니다; 유비퀴틴-프로테아좀 시스템에 의한 분해는 활성 MAP3K8을 방출시켜 MAPK 신호를 전파합니다.
• 세포내 위치는 동적입니다: NF-κB 복합체는 주로 IκB 억제제에 결합된 비활성 상태로 세포질에 상주하며, 활성화 시 핵으로 이동합니다.
• 인산화, 아세틸화, 히드록실화, 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 NFKB1의 활성, 안정성 및 상호작용을 조절합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯의 경우, 핵 및 세포질 분획화는 p105 (105 kDa) 및 p50 (50 kDa) 밴드를 구별하는 데 도움이 될 수 있습니다; 적절한 로딩 대조군으로 검증하십시오.
• IHC-P에서는 항원 회복을 최적화하고, 알려진 NF-κB 양성 (예: 면역 조직) 및 음성 대조군으로 염색 패턴을 검증하는 것을 고려하십시오.
• CHIP의 경우, 항체가 κB 부위를 포함하는 프로모터 영역을 농축할 수 있는지 확인하십시오; 양성 (예: TNFA) 및 음성 유전자 좌위를 이용한 파일럿 실험이 권장됩니다.
• 면역원이 합성 펩타이드이므로, siRNA 녹다운 또는 면역 펩타이드와의 경쟁 실험을 통해 다른 NF-κB 패밀리 구성원과의 교차 반응성을 평가해야 합니다.

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