Anti-NLRP3 Rabbit Monoclonal Antibody for WB, ELISA - Q96P20

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NLRP3 기능 및 국소화

• NLRP3(NACHT, LRR 및 PYD 도메인 함유 단백질 3)은 크리오피린(cryopyrin) 또는 CIAS1로도 알려져 있으며, 선천성 면역 방어의 중심인 다중 단백질 복합체인 NLRP3 인플라마솜의 핵심 센서 구성 요소입니다.
• 세포 외 ATP, 니게리신(nigericin), 요산 일나트륨 결정 또는 아밀로이드-베타와 같은 다양한 병원체 및 손상 관련 신호를 감지하면, NLRP3는 PYCARD/ASC 및 프로-카스파제-1(pro-caspase-1)을 모집하여 인플라마솜 조립을 시작합니다. 이는 카스파제-1 활성화, IL-1β/IL-18 분비 및 파이로프토시스(pyroptotic) 세포 사멸로 이어집니다. 관련 참고문헌: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:27432880 PMID:23582325 PMID:28847925 PMID:31189953
• NLRP3 활성화는 엄격하게 조절됩니다. K+ 유출(K+ efflux)이 필요하며, 다이닌(dynein) 매개 운송을 통해 미세관 조직 센터(MTOC)로 이동한 후 NEK7에 의해 잠금이 해제됩니다. 그 후 포스파티딜이노시톨 4-인산 결합을 통해 분산된 트랜스-골지 네트워크(dTGN) 막으로 재배치되어 활성 인플라마솜을 형성합니다. 관련 참고문헌: PMID:36442502 PMID:39173637 PMID:30487600 PMID:34554188
• 전형적인 인플라마솜 역할 외에도, NLRP3는 핵 내에서 전사 조절因子로 독립적으로 기능하여 DNA에 결합하고 IL4 발현을 유도함으로써 Th2 세포 분화를 촉진합니다.
• 이 단백질은 세포질, 미토콘드리아, 골지체, 소포체 및 핵을 포함한 여러 세포 내 구획으로 역동적으로 국소재하며 분비될 수 있습니다.
• 주로 대식세포에서 발현되는 NLRP3는 수지상세포, B 및 T 세포뿐만 아니라 편평 상피와 흉선의 하살 소체(Hassall's corpuscles)에도 존재합니다. 관련 참고문헌: PMID:33231615 PMID:34133077 PMID:11786556 PMID:17164409
• 인산화, ADP-리보실화, 팔미토일화, 이황화 결합 형성 및 유비퀴틴화를 포함한 주요 번역 후 수정은 NLRP3의 안정성, 국소화 및 활성을 정교하게 조절합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 웨스턴 블롯팅의 경우 저농도 SDS-PAGE 젤(예: 8%)을 사용하고 고분자량 NLRP3(~118 kDa)에 대한 전달 조건을 최적화하는 것이 좋습니다. LPS로 자극된 THP-1 대식세포 용해물과 같은 양성 대조군이 도움이 될 수 있습니다.
• 이 토끼 단일클론 항체는 표준 ELISA 형식에 적합합니다. 분석을 설정할 때 코팅 농도를 평가하고 특정 샘플 매트릭스에 적합한 검출 항체와 페어링하십시오.
• NLRP3 발현은 염증 상태에서 유도될 수 있으므로, 세포 모델을 NLRP3 활성화제(예: LPS 및 니게리신)로 전처리하면 WB와 ELISA 모두에서 검출이 향상될 수 있습니다.

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