WB, IP, ELISA용 항-NLRP3 Rabbit Monoclonal Antibody - Q96P20

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: NLRP3 기능 및 위치

• NLRP3 (NACHT, LRR 및 PYD 도메인 함유 단백질 3), 일명 cryopyrin은 NLRP3 인플라마솜의 센서 구성 요소 역할을 하는 세포질 패턴 인식 수용체입니다. 관련 참고문헌: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:18604214
• 병원체, 결정 또는 환경 입자에 의해 활성화되면, NLRP3는 올리고머화하여 ASC 및 프로-카스파제-1을 모집하여 인플라마솜 복합체를 형성하고, 이는 카스파제-1 활성화를 촉진합니다. 이는 전염증성 사이토카인 IL-1β 및 IL-18의 절단 및 분비와 가스더민 D 매개 피로프토시스로 이어집니다. 관련 참고문헌: PMID:23582325, PMID:28847925, PMID:31189953
• NLRP3 인플라마솜은 또한 알라르민 HMGB1의 비정형적 분비를 유도하여 염증 반응을 증폭시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:22801494
• 휴지 상태에서 NLRP3는 자동 억제된 ADP 결합 상태로 유지됩니다. K+ 유출 및 막 교란을 유도하는 다양한 자극이 그 구조적 활성화를 촉발합니다. 관련 참고문헌: PMID:35114687
• 활성화 후, NLRP3는 미세소관 조직 중심(MTOC)으로 운반되어 NEK7에 의해 잠금 해제된 후, 인지질포스파티딜이노시톨 4-인산(PtdIns4P)에 결합하여 분산된 트랜스 골지 네트워크(dTGN) 소포로 재위치하여 활성 인플라마솜 조립으로 이어집니다. 관련 참고문헌: PMID:36442502, PMID:39173637
• 인플라마솜 역할과 독립적으로, NLRP3는 T 헬퍼 2 (Th2) 세포에서 전사 조절자로 작용하여 DNA에 결합하고 IL-4 발현을 촉진하여 Th2 분화를 유도하며, 이는 알레르기 천식 및 종양 성장과 관련이 있습니다.
• 세포 내 소기관 수준에서, NLRP3는 세포질, 미토콘드리아, 소포체, 골지체에 위치하며 분비될 수 있습니다. 주로 대식세포, 수지상 세포 및 상피 장벽에서 발현되며, 단핵구 및 조골세포에서는 낮은 수준으로 발현됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 NLRP3의 N-말단 PYD 도메인 근처의 아미노산 100–210에 해당합니다. 이 항체가 이 영역의 에피토프를 인식할 수 있으므로, 절단되거나 돌연변이된 구조체를 평가할 때 관련성을 고려하십시오.
• Western blot의 경우, NLRP3 발현이 알려진 인간 대식세포 또는 말초혈액 단핵세포 용해물을 사용하여 항체를 검증하십시오. 약 118 kDa에서 밴드가 예상됩니다.
• 면역침강 실험에서는 표적이 인플라마솜 내에서 여러 단백질과 상호작용하므로, NLRP3 복합체의 무결성을 보존하기 위해 최적화된 용해 조건을 확보하십시오.
• ELISA 적용의 경우, 최적의 코팅 및 검출 농도를 확립하기 위해 재조합 NLRP3 또는 세포 용해물을 사용한 예비 체커보드 적정을 권장합니다.
• NLRP3 활성화는 번역 후 변형(예: 유비쿼티네이션, 인산화)을 포함할 수 있으므로, 검출 패턴의 변화를 관찰하기 위해 적절한 자극(예: LPS + nigericin)으로 세포를 처리하는 것을 고려하십시오.

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