WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용 항-NRF2 다클론 항체 - Q16236

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NRF2의 기능 및 위치

• NRF2(핵인자 적혈구계 2 관련 인자 2, NFE2L2라고도 함)는 NFE2L2 유전자에 의해 암호화되는 전사 인자로, 분자량은 약 68 kDa입니다. 이는 cap 'n' collar 염기성 영역 류신 지퍼(CNC-bZIP) 계열에 속합니다.
• NRF2는 세포 보호 유전자의 프로모터 영역에 존재하는 항산화 반응 요소(ARE)에 결합하여 2상 해독 효소를 포함한 유전자들의 발현을 조절하고 반응성 친전자체를 중화함으로써 산화 스트레스에 대한 세포 방어에서 중심적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• 기저 조건에서 NRF2는 KEAP1-CUL3-RBX1 E3 유비퀴틴 리가제 복합체에 의해 유비퀴틴화되고 세포질에서 빠르게 분해됩니다. 산화 또는 친전자성 스트레스가 발생하면 KEAP1이 억제되어 NRF2가 축적되고 핵으로 이동하며, 소형 Maf 단백질과 이종이량체를 형성하여 표적 유전자 전사를 활성화합니다. 관련 참고문헌: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201, PMID:19489739, PMID:29590092
• 선택적 자가포식 또한 NRF2를 활성화합니다. 자가포식 수용체 SQSTM1/p62가 KEAP1과 상호작용하여 이를 격리하고 KEAP1 불활성화를 유도함으로써 NRF2의 핵 축적과 세포 보호 유전자 발현을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:20452972
• 단백질 접힘 이상 반응(UPR) 동안 NRF2가 활성화되어 소포체 스트레스 상황에서 산화환원 항상성과 세포 생존에 기여합니다.
• NRF2는 염증 유발성 사이토카인 전사를 차단하고 염증 유발 유전자 인근에서 RNA 중합효소 II의 모집을 억제하여 대식세포 매개 염증을 억제합니다. 이는 NRF2의 정규 결합 모티프 및 ROS 수준과 무관하게 이루어집니다.
• NRF2는 바이러스 감염을 제한합니다. STING1 발현을 억제하여 세포질 항바이러스 DNA 감지를 억제하고, I형 인터페론 비의존적 기전을 통해 여러 병원성 바이러스(예: SARS-CoV-2, HSV-1, 백시니아 바이러스, 지카 바이러스)의 복제를 억제합니다. 관련 참고문헌: PMID:30158636, PMID:33009401
• NRF2는 광범위하게 발현되며, 성체의 근육, 신장, 폐, 간 및 태아 근육에서 가장 높은 수준으로 발현됩니다. 세포 신호에 반응하여 동적으로 이동하며 세포질과 핵 모두에 위치합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 다클론 항체는 인간 NRF2의 아미노산 366-605에 해당하는 재조합 단백질을 사용하여 제작되었으며, C-말단 영역을 표적으로 합니다. 전체형과 변형형을 모두 검출할 수 있으므로, 실험 시스템에서 노크다운 또는 녹아웃 대조군을 사용하여 특이성을 확인하는 것이 좋습니다.
• 웨스턴 블롯에서는 약 68 kDa 부근의 밴드가 예상됩니다. 인산화 또는 유비퀴틴화와 같은 번역 후 변형으로 인해 밴드가 이동할 수 있으므로, 로딩 대조군과 검출 시약을 최적화해야 합니다.
• IHC-P에서는 항원 회복 및 차단 단계가 중요합니다. NRF2를 높은 수준으로 발현하는 간 또는 신장과 같은 양성 대조 조직을 사용하십시오.
• IF/ICC에서는 투과화 및 고정 조건을 최적화해야 합니다. 산화 스트레스에 따른 NRF2의 핵 이동은 처리 세포와 무처리 세포를 비교하여 평가할 수 있습니다.
• ELISA 적용에서는 적합한 2차 항체와의 조합 또는 샌드위치 쌍의 일부로 항체를 사용하는 방법이 포함될 수 있습니다. 재조합 단백질 또는 세포 용해물을 사용하여 검증하십시오.

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