WB, IF, IHC, ELISA용 Anti-PARP1 Rabbit Monoclonal Antibody - P09874

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PARP1 기능 및 위치

• PARP1은 poly-ADP-ribosyltransferase로 작용하여 NAD+로부터 표적 단백질로 ADP-ribose 단위를 전달하는 반응을 촉매합니다. 이 활성은 DNA 손상 수리 및 게놈 무결성 유지의 핵심입니다. 관련 참고문헌: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500

• DNA 가닥 절단을 인식하면, PARP1은 HPF1을 모집하여 히스톤의 세린 ADP-리보실화(예: H2B의 Ser6, H3의 Ser10)를 시작하여 염색질 탈압축 및 수리 복합체 조립을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:17177976

• PARP1은 염기 절제 수리 (BER) 및 이중 가닥 절단 수리 (DSBR) 경로 모두에 참여합니다. TIMELESS와 협력하여 수리 인자들을 poly-ADP-리보실화함으로써 상동 재조합을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:26344098, PMID:30356214

• DNA 수리 외에도, PARP1은 히스톤 H1과 유사한 방식으로 뉴클레오솜에 결합하고 염색질 구조를 변경하여 RNA 중합효소 II 활성을 억제함으로써 전사를 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:15607977, PMID:22464733

• PARP1은 프로그램된 세포사멸의 중요한 매개체입니다. 그 caspase-3/7 절단 생성물은 세포질로 이동하여 poly-ADP-ribose 사슬을 운반하며, 이는 AIFM1 의존적 세포사멸을 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:33168626

• 세포 내 위치적으로, PARP1은 주로 핵, 핵소체 및 염색체에 존재합니다. PRKDC에 의한 인산화 후, 세포질로 이동하여 cGAS-STING 경로와 같은 선천 면역 경로를 조절할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:35460603

• PARP1은 자가-폴리-ADP-리보실화를 촉매하며, 이는 그 활성, 단백질 상호작용 및 DNA 손상 부위로의 모집을 조절하는 주요 조절 변형입니다. 관련 참고문헌: PMID:17396150, PMID:19764761, PMID:24906880

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 PARP1의 아미노산 200–300 내에 위치하며, 두 번째 아연 손가락 및 BRCT 도메인의 일부를 포함하는 영역입니다. 생성된 토끼 단일클론 항체는 기재된 반응 종(인간, 마우스, 래트)에서 보존된 에피토프를 인식할 것으로 예상됩니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 약 113 kDa에서 주된 밴드가 검출되어야 합니다. 샘플 원천으로 핵 추출물을 사용하고 PARP1의 siRNA 매개 녹다운으로 특이성을 검증하는 것을 고려하십시오.
• 면역형광(IF/ICC) 및 면역조직화학(IHC-P)에서는 핵 또는 염색체 염색 패턴을 예상할 수 있습니다. 파라핀 포매 조직 절편은 항원 회복이 필요할 수 있으므로, 사용 조직에 대해 시트르산 또는 EDTA 기반 열 유도 에피토프 회복 프로토콜을 최적화하십시오.
• 이 항체는 ELISA 응용 분야에 보고되었습니다. 샌드위치 ELISA의 경우, 별개의 에피토프를 표적으로 하는 두 번째 클론과 짝을 이루는 것이 권장됩니다; 내부에서의 쌍별 스크리닝을 통해 최적의 포획/검출 조합을 식별할 수 있습니다.
• PARP1은 광범위한 번역 후 변형 및 절단을 겪기 때문에, 결과를 해석할 때 생물학적 맥락(예: DNA 손상 유도, 세포사멸)을 고려하십시오. 처리 조건에 따라 전체 길이 및 절단 형태가 공존할 수 있습니다.

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