WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용 항-PHD2/EGLN1 다클론 항체 - Q9GZT9

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PHD2/EGLN1 기능과 위치

• PHD2/EGLN1(Egl nine homolog 1)은 HIF-프롤릴 하이드록실라제 2(HIF-PH2) 또는 PHD2로도 불리며, EGLN1 유전자에 의해 암호화되는 세포성 산소 센서입니다. 프로릴 하이드록실라제의 EGLN 패밀리에 속하며, 정상 산소 조건에서 저산소 유도 인자(HIF) 안정성을 조절하는 주요 아이소자임입니다.
• 정상 산소 수준에서 PHD2는 HIF-1α와 HIF-2α의 산소 의존성 분해(ODD) 도메인 내 특정 프롤린 잔기의 수산화를 촉매합니다. 이 번역 후 변형은 폰 힙펠-린다우(VHL) E3 유비퀴틴 리가아제 복합체에 의한 인식을 촉진하여 HIFα 서브유닛의 프로테아좀 분해를 유도합니다. 결과적으로 HIF 매개 전사 프로그램이 억제됩니다.
• 저산소증 동안 PHD2 활성이 감소하면 HIFα 단백질이 축적되어 HIF-1β와 이량체를 형성하고 핵으로 이동하여 혈관신생, 적혈구 생성, 대사 적응 및 세포 생존에 관여하는 유전자의 발현을 유도합니다. 이 기전은 감소된 산소 가용성에 대한 세포 적응의 기초가 됩니다.
• PHD2는 주로 세포질에 위치하지만 핵에서도 검출될 수 있으며, 이는 두 구획에서 산소를 감지하고 HIFα 단백질을 변형시키는 역할과 일치합니다.
• 조직 전반에 걸쳐 널리 발현되며, 가장 높은 mRNA 수준은 골격근, 심장, 뇌, 신장 및 부신에서 관찰됩니다(PubMed:11056053; PubMed:12351678). 단백질은 심근 세포, 대동맥 내피 세포 및 관상 동맥 평활근에서 검출됩니다. 태아 조직에서도 상당한 발현이 관찰되며, 특히 뇌, 심장, 비장 및 골격근에서 높습니다(PubMed:12788921). 관련 참고문헌: PMID:11056053 PMID:12351678 PMID:12788921
• PHD2는 아세틸화, 인산화, S-니트로실화 등 여러 번역 후 변형을 거치며, 이는 활성이나 안정성을 조절할 수 있습니다. 디옥시게나제 활성을 위해 철, 2-옥소글루타르산, 아스코르브산(비타민 C)을 보조인자로 필요로 하며 아연 핑거 도메인을 포함합니다.
• EGLN1의 돌연변이는 선천성 적혈구증가증 3형(ECYT3)과 연관되어 있으며, 에리트로포이에틴 조절과 적혈구 생성에서의 중요한 역할을 강조합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 이 다클론 항체를 생성하는 데 사용된 면역원은 표준 서열에 해당하는 인간 PHD2/EGLN1의 거의 전장(aa 1-426)을 포함하는 재조합 단백질입니다. 이 디자인은 여러 응용 분야에서 내인성 단백질의 인식을 향상시킬 수 있습니다.
• 웨스턴 블로팅(WB) 적용 시 약 46 kDa의 예상 분자량에 해당하는 특이 밴드가 관찰되어야 합니다. 샘플 준비, 로딩량, 검출 조건의 최적화가 권장됩니다. 골격근이나 심장처럼 PHD2 발현이 높은 조직에서 유래한 양성 대조군이 유용할 수 있습니다.
• 면역조직화학(IHC-P)과 면역형광(IF/ICC)에서는 다양한 항원 회수 방법과 항체 희석 비율을 테스트해 보는 것을 고려하십시오. PHD2는 세포질과 핵에 이중으로 위치하므로 세포의 산소 상태 맥락에서 염색 패턴을 평가해야 합니다. 적절한 조직 유형이나 세포주 대조군(예: 정상 산소 vs 저산소)은 특이성을 확인하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• ELISA 기반 분석의 경우, 관련 샘플 매트릭스에서 검증 후 이 항체는 포획 또는 검출 시약으로 적합할 수 있습니다. 사용자는 특정 프로토콜 요구 사항에 따라 교차 반응성 및 간섭 테스트를 수행해야 합니다.
• 이 항체는 마우스와 래트 PHD2/EGLN1과 교차 반응한다고 보고되었지만, 목적하는 적용 분야에서 해당 종에서의 동등한 반응성을 확인하기 위해 서열 정렬과 파일럿 실험이 권장됩니다.

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