WB, ELISA용 항인 포스포-Chk1(S280) 단클론 항체 - O14757

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 세린/트레오닌 단백질 키나아제 Chk1의 기능과 위치

• 세린/트레오닌 단백질 키나아제 Chk1(CHEK1)은 체크포인트 매개 세포 주기 정지 및 DNA 복구에 필수적인 키나아제입니다. 대안적 스플라이싱 동형체(아이소폼 2)는 아이소폼 1의 내인성 억제제로 작용하여 기능을 길항합니다.
• DNA 손상 반응에 필요합니다: 기질 공통 서열 [R-X-X-S/T]을 인식하고 CDC25A, CDC25B, CDC25C를 인산화시켜 14-3-3 결합 부위를 생성하며, 이는 이러한 포스파타아제를 억제하거나 CDC25A 분해를 촉진하여 CDK-사이클린 복합체의 억제성 티로신 인산화와 세포 주기 정지를 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Thr-309에서 RAD51을 인산화시켜 BRCA2로부터의 유리를 촉진하고 염색질 결합을 강화하여 상동 재조합에 의한 DNA 복구를 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:15665856
• TP53의 여러 C-말단 부위를 인산화시켜 아세틸화와 활성화를 강화하여 세포 주기 정지를 촉진하고 증식을 억제합니다. 관련 참고문헌: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• FANCE(DNA 가교 복구), TLK1(염색질 조립), Thr-11의 히스톤 H3.1(후성유전자 발현 침묵), RB1(E2F 상호작용 촉진), SPRTN(염색질 모집) 및 PABIR1/FAM122A(G2/M 체크포인트 조절)를 포함한 다른 기질도 인산화시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071 PMID:17380128 PMID:31316063 PMID:33108758
• 세포내 위치는 핵, 염색체, 세포질 및 중심체로, 체크포인트 신호전달, DNA 복구 및 세포 주기 조절에서의 역할과 일치합니다.
• 전신에 널리 발현되며 흉선, 고환, 소장 및 대장에서 가장 높은 수준으로 발현됩니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 Chk1의 Ser280 주변의 인산화 펩타이드입니다. 이 항체는 인산화 형태를 특이적으로 인식하도록 설계되었습니다. 포스파타아제 처리된 샘플과 처리되지 않은 샘플의 신호를 비교하거나 비인산화 차단 펩타이드를 사용하여 특이성을 검증하세요.
• 웨스턴 블롯의 경우, 샘플 준비 시 적절한 포스파타아제 억제제를 사용하여 인산화 신호를 보존하는 것이 권장됩니다. Chk1의 경우 54 kDa 부근에서 밴드가 예상됩니다.
• ELISA에서는 인 특이성을 확인하기 위해 플레이트에 결합된 인산화 펩타이드와 비인산화 펩타이드 대조군을 사용하는 것을 고려하세요.
• Ser280의 Chk1 인산화는 DNA 손상에 의해 유도됩니다. DNA 손상 유발 물질(예: UV, 히드록시우레아)로 세포를 자극하면 관련 세포주에서 검출이 향상될 수 있습니다.

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