WB, ELISA용 항인산-Chk1-S296 토끼 단클론 항체 - O14757

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CHK1 기능과 위치

• CHK1(체크포인트 키나아제-1)은 CHEK1 유전자에 의해 암호화되는 세린/트레오닌 단백질 키나아제로, 선택적 스플라이싱을 통해 여러 아이소폼으로 존재합니다.
• DNA 손상이나 복제되지 않은 DNA에 반응하여 체크포인트 매개 세포주기 정지 및 DNA 복제 활성화에 필수적이며, 이를 통해 게놈 무결성을 유지합니다. 관련 참고문헌: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• CHK1은 CDC25 포스파타아제 패밀리(CDC25A, B, C)를 인산화하여 이들을 억제하고 이후 CDK-사이클린 복합체를 비활성화시켜 세포주기 진행을 차단합니다. 관련 참고문헌: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• C-말단 여러 부위에서 TP53을 직접 인산화하여 TP53 활성화, 세포주기 정지 및 세포 증식 억제를 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• CHK1은 Thr-309에서 RAD51을 인산화하여 상동 재조합 수리를 조절하고, RAD51의 염색질 결합과 DNA 수리를 향상시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:15665856
• 추가 기질로는 FANCE(교차결합 수리), TLK1(염색질 조립), SPRTN(염색질 모집), PABIR1/FAM122A(G2/M 체크포인트) 및 히스톤(전사 조절)이 있으며, 게놈 유지 관리에서 다면적 역할을 한다는 점이 강조됩니다. 관련 참고문헌: PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• 세포 내에서 CHK1은 핵, 염색체, 세포질 및 중심체에 위치하며, 이는 DNA 손상 신호전달 및 세포주기 조절에서의 다양한 기능과 일치합니다.
• CHK1은 널리 발현되며 흉선, 고환, 소장 및 결장에서 가장 높은 수준으로 발현되고, 그 활성은 여러 잔기에서의 인산화에 의해 엄격하게 조절됩니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯의 경우 인산화 상태를 유지하기 위해 용해 완충액에 포스파타아제 저해제를 첨가하고, 54 kDa 부근에서 밴드 크기를 검증하십시오.
• Ser296에서의 인산 특이성을 확인하기 위해 DNA 손상 유도 물질(예: 에토포시드, 하이드록시우레아)로 처리한 세포의 용해물로 항체를 테스트하십시오.
• 이 항체는 인간 Chk1에 대해 검증되었으며, 다른 종과의 교차 반응성은 개별적으로 평가해야 합니다.
• ELISA의 경우 인산화 펩티드와 비인산화 펩티드를 모두 코팅하여 인산 선택성을 확인하는 것을 고려하십시오.

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