WB, IF/ICC, ELISA용 항인산화 EGFR-Y845 단클론 항체 - P00533

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: EGFR의 기능과 위치

• EGFR(상피세포 성장 인자 수용체)는 ErbB-1 또는 HER1로도 알려져 있으며, ERBB 패밀리에 속하는 막횡단 수용체 티로신 키나아제입니다. 대안적 스플라이싱된 아이소폼(isoform 2)은 EGF 작용의 길항제로 기능할 수 있습니다.
• 수용체 티로신 키나아제로서 EGFR는 다양한 EGF 패밀리 리간드에 결합하여 세포 내 신호 연쇄 반응을 촉발하며, 세포 증식, 분화, 생존을 포함한 적절한 세포 반응으로 세포 외 신호를 전환합니다 (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960). 관련 참고문헌: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960
• 알려진 리간드로는 EGF, TGFA/TGF-알파, AREG, 에피젠/EPGN, BTC/베타셀룰린, 에피레귤린/EREG, HBEGF/헤파린 결합 EGF가 있습니다 (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). 관련 참고문헌: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• 리간드 결합은 수용체 동종이량체화 및/또는 이종이량체화를 유도하고 주요 세포질 타이로신에서 후속 자가인산화를 일으킵니다. 키나아제 도메인의 활성화 루프에 위치한 인산화된 타이로신 845(Y845)는 활성 형태를 안정화하고 촉매 활성을 높이는 데 매우 중요합니다.
• 자가인산화는 GRB2와 같은 어댑터 단백질의 모집을 유도하고, RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLC감마-PKC, STAT 및 가능성 있는 NF-카파B를 포함한 여러 다운스트림 모듈을 활성화합니다 (PubMed:11116146, PubMed:27153536). 관련 참고문헌: PMID:11116146 PMID:27153536
• EGFR는 RGS16(GTPase 활성을 활성화) 및 MUC1(SRC 및 베타카테닌과의 상호작용을 강화)과 같은 다른 단백질을 직접 인산화합니다 (PubMed:11602604, PubMed:11483589). 관련 참고문헌: PMID:11602604 PMID:11483589
• CCDC88A/GIV와의 상호작용을 통해 세포 이동을 양성 조절하며, 리간드 자극 시 세포막에서 EGFR를 유지합니다 (PubMed:20462955). 관련 참고문헌: PMID:20462955
• EGFR는 주로 세포막에 위치하지만 소포체, 골지체, 핵, 엔도좀에서도 발견되며 엑소좀으로 분비될 수도 있습니다. 널리 발현되며 아이소폼 2는 특히 난소암에서 검출됩니다.
• 정상적인 생리적 역할 외에도, EGFR는 C형 간염 바이러스(HCV) 침입 시 숙주 세포 수용체로 작용하며, CD81-CLDN1 공동수용체 복합체 형성을 매개하고 바이러스 막 융합을 촉진합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 본 항체는 인산화 의존적 에피토프를 인식하므로, 용해 완충액에 포스파타아제 저해제를 첨가하고 인산화 신호를 보존하기 위해 저온에서 빠르게 샘플을 처리하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 134 kDa 부근에서 주요 밴드가 나타납니다. 인산화 특이성을 확인하려면 세포 용해물을 람다 포스파타아제로 처리하거나 면역원 펩티드의 비인산화 대응물을 사용한 펩티드 경쟁 분석을 수행하는 것을 고려하십시오.
• 면역형광/ICC에서는 주로 막 연관된 염색 패턴이 예상되며, 원형질막 마커와 공동염색하면 위치를 확인하는 데 도움이 됩니다.
• ELISA 적용의 경우, 본 항체는 인산화된 EGFR를 포획하거나 검출하는 데 사용할 수 있으며, 코팅 및 검출 조건을 실험적으로 최적화하십시오.
• 인간에서 반응성이 검증되었으며, 다른 종의 경우 Y845 주변 서열 상동성과 교차 반응성을 실험적으로 확인하십시오.

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