Anti-Phospho-eIF4EBP1-S65 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, ELISA - Q13541

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: eIF4EBP1 기능 및 위치

• eIF4EBP1 (진핵생물 번역 개시 인자 4E-결합 단백질 1)은 PHAS-I (인슐린에 의해 조절되는 인산화된 열 및 산 안정성 단백질 1)로도 알려져 있으며, 캡 의존적 번역 개시의 주요 억제제입니다.
• 저인산화 상태에서 4E-BP1은 eIF4G와 경쟁하여 eIF4E에 결합함으로써 eIF4F 복합체의 조립을 방해하고 번역을 억제합니다. Ser65와 같은 고인산화는 eIF4E로부터의 해리를 촉진하여 캡 의존적 번역이 진행되도록 합니다.
• 4E-BP1은 MAP 키나제 및 mTORC1 경로를 통해 성장 인자, 호르몬, 영양소의 신호를 통합하며, mTORC1 매개 다중 부위(Thr37/46, Ser65, Thr70 포함) 인산화는 그 불활성화에 중요합니다.
• 4E-BP1은 eIF4E-결합 단백질 패밀리에 속하며, eIF4E의 등쪽 표면과 직접 상호작용하는 보존된 eIF4E-결합 모티프(YXXXXLΦ)를 공유합니다.
• 세포 내 위치는 주로 세포질이지만, 4E-BP1은 핵으로 이동할 수 있으며, 여기서 핵 내 번역이나 다른 기능을 조절할 수 있습니다. 구획화된 인산화 역학은 다를 수 있습니다.
• 인산화 외에도, 4E-BP1은 아세틸화, 유비퀴틴화(이소펩타이드 결합 형성) 및 안정성과 활성을 미세 조절하는 다른 번역 후 변형을 겪으며, 이는 인산단백질 및 유비퀴틴 유사 접합체의 표적으로 분류됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 Ser65 주변의 합성 인산화 펩타이드이므로, 항체의 반응성은 인산화 특이적일 것으로 예상됩니다. ELISA의 경우, 인산화 특이성을 확인하기 위해 항체를 비인산화 펩타이드와 사전 배양하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯에서 총 단백질 수준과 인산화 상태를 모니터링하기 위해 총 4E-BP1 검출(범용 항체 사용)을 포함하십시오. 용해 완충액에 적절한 포스파타제 억제제를 사용하십시오.
• 이 항체는 인간 4E-BP1을 인식합니다. 인간 세포주 또는 조직 샘플에서 성능을 검증하십시오; 다른 종에 대한 반응성은 보고되지 않았으므로 비인간 샘플에 적용할 경우 교차 반응성 테스트를 권장합니다.
• 토끼 폴리클로날 항체로서, 로트 간 일관성을 모니터링해야 하며, 특정 로트를 사용한 파일럿 실험을 권장합니다.

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