WB, IHC-P, ELISA용 Anti-Phospho-eNOS-S1177 폴리클로날 항체 - P29474

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: eNOS 기능 및 위치

• eNOS (일산화질소 합성효소 3)는 구성적으로 발현되는 효소로, cGMP 매개 경로를 통한 혈관 평활근 이완 및 VEGF 유도 혈관신생에 관여하는 중요한 신호 분자인 일산화질소(NO)의 생산을 촉매합니다. 관련 참고문헌: PMID:1378832
• eNOS에 의해 생성된 NO는 또한 혈소판 활성화 및 혈액 응고 조절에 역할을 합니다.
• 이 효소는 플라즈마 막, 카베올라, 세포질, 세포골격 및 골지체에 위치하여, 그 역동적인 세포 내 조절을 반영합니다.
• eNOS는 혈소판, 태반, 간 및 신장에서 발현됩니다.
• 대체 스플라이싱은 eNOS 활성이 결여된 우성-음성 이소형을 생성하며, 이는 이소형 1과 이종이량체를 형성함으로써 eNOS 기능을 하향 조절할 수 있습니다.
• 주요 번역 후 변형에는 Ser1177(이 항체가 인식하는 에피토프)에서의 인산화와 막 고정을 위한 미리스토일화 및 팔미토일화가 포함됩니다.
• eNOS 활성은 헴, FAD, FMN, NADP, 칼모둘린 및 칼슘과 아연과 같은 금속과 같은 보조 인자에 의존합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯의 경우, 인산화 특이성을 확인하고 탈인산화를 방지하기 위해 적절한 대조군(예: 비자극 대 자극된 내피 세포) 및 인산가수분해효소 억제제를 포함하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)에서, 항원 회복을 사용하여 파라핀 포매 절편에서 항체를 검증하고, 특이성을 평가하기 위해 인산화-비의존적 eNOS 항체로 병렬 염색을 수행하십시오.
• ELISA 적용의 경우, 이 항체는 세포 용해물 또는 재조합 단백질 준비물에서 포스포-eNOS(Ser1177)를 포착하거나 검출하는 데 사용될 수 있습니다. 정규화를 위해 총 eNOS 항체 사용을 고려하십시오.
• eNOS의 예측 분자량은 약 133 kDa입니다. 명확한 분리를 위해 적절한 분자량 마커와 겔 농도를 사용하십시오.
• 인간과 마우스에 대한 교차 반응성이 보고되었습니다. 다른 종을 사용하는 경우, 에피토프 보존을 평가하고 경험적으로 반응성을 검증하기 위해 서열 정렬을 수행하십시오.

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