WB, ELISA용 Anti-Phospho-FAK-Y925 토끼 다클로날 항체 - Q05397

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: FAK 기능 및 국소화

• 초점 접착 키나제 1(FAK/PTK2)은 세포 이동, 접착, 확산(spreading) 및 액틴 골격 재구성의 중요한 조절 인자인 비수용체 티로신 키나제입니다. 인테그린, 성장 인자 수용체 및 G 단백질 결합 수용체로부터의 신호를 통합합니다.
• FAK는 활성화 시 Y397에서 자가 인산화되어 SRC 패밀리 키나제에 대한 고친화 결합 부위를 생성합니다. 이후 Y925에서의 인산화는 GRB2 모집을 촉진하여 MAP 키나제/ERK 신호 전달 캐스케이드에 연결하고 세포 증식 및 생존에 기여합니다.
• 이 단백질은 초점 접착, 세포막, 핵주위 세포질, 세피질(cortex), 중심체 및 핵으로 동적으로 국소화됩니다. 이러한 분포는 신호 전달 및 골격 재구성의 시공간적 제어를 가능하게 합니다.
• FAK는 NEDD9(인테그린 매개 신호 강화), BCAR1, GRB7 및 SRC 자체를 포함한 여러 기질을 인산화하여 PI3K/AKT 및 Rho GTPase 캐스케이드와 같은 하위 경로를 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:9360983
• 아이소폼 6(FRNK)은 키나제 도메인이 결여된 대안 스플라이싱 변이체로, FAK 인산화 및 핵 신호를 차단하여 SRF 의존적 전사를 억제함으로써 내인성 억제제로 작용합니다.
• FAK는 B 및 T 림프구, 폐 섬유아세포 및 상피 세포에서 현저하게 검출되며 광범위하게 발현됩니다. 관련 참고문헌: PMID:31630787
• 번역 후 수정, 특히 Y397, Y576, Y577, Y861 및 Y925 잔기의 인산화는 FAK 활성을 엄격하게 조절합니다. Y925 인산화는 GRB2와의 상호작용 및 MAPK 경로 활성화를 구체적으로 주도하므로, 발생 및 암 문맥에서 FAK 신호의 핵심 마커가 됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 FAK의 티로신 925 주변 합성 인산화 펩타이드이며, 이 항체는 해당 부위에서 인산화된 경우에만 FAK를 인식할 것으로 예상됩니다. WB에서 최적의 특이성을 위해 인산화를 유지하기 위해 샘플 준비 중 인산가수분해 억제제를 사용하는 것이 좋습니다.
• 예상 분자량: ~119 kDa. 사람 세포 용해물에서 이 크기 근처의 밴드는 검출을 지원하지만, 아이소폼 또는 번역 후 수정으로 인한 추가 밴드가 발생할 수 있으므로 총 FAK 대조군과 비교하십시오.
• ELISA의 경우 인산화 특이성을 확인하기 위해 비인산화 펩타이드 대조군을 포함하십시오. 특정 분석 조건에서 배경을 최소화하고 신호 대 잡음 비를 최대화하기 위해 항체 농도를 적정(titrate)하십시오.
• 이 제품은 사람 샘플과의 반응성이 문서화되어 있으며, 다른 종과의 교차 반응성은 알려져 있지 않습니다. 비사람 모델 시스템에서는 적절한 양성 및 음성 대조군을 통해 성능을 검증하십시오.

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