Anti-Phospho-NCF4 (p40-phox) T154 Rabbit Polyclonal Antibody for WB and ELISA - Q15080

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NCF4/p40-phox 기능 및 국소화

• NCF4는 호중구 세포질 인자 4(neutrophil cytosol factor 4), 즉 p40-phox를 암호화하며, 이는 식세포 NADPH 산화효소 복합체의 필수적인 조절 소단위체입니다.
• p40-phox는 다른 세포질 인자들과 함께 NOX2 효소 복합체의 조립 및 활성화에 참여하여, 미생물 살균을 위한 초화산화물 이온을 생성합니다.
• 이 단백질은 인산티오시톨 3-인산(phosphatidylinositol 3-phosphate)에 결합하는 N-말단 PX 도메인을 포함하며, 이를 통해 복합체를 식포체(Phagosome) 및 엔도솜 막으로 표적합니다.
• 중앙 SH3 도메인은 다른 산화효소 소단위체와의 상호작용을 매개하여 복합체 조립을 촉진합니다.
• Thr154의 인산화는 활성화에 결정적이며, 입체 구조의 변화와 막 이동을 촉진합니다.
• NCF4는 조혈 세포에서만 발현되며 선천성 면역 방어에서 특화된 역할을 수행합니다.
• NCF4의 돌연변이는 만성 육아종증(Chronic Granulomatous Disease, CGD)과 관련이 있으며, 이는 초화산화물 생성 결함으로 인한 반복적인 감염이 특징입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 비인산화 펩타이드로 항체를 전처리하거나 세포 용해물을 인산가수분해효소(Phosphatase)로 처리하여 인산화 특이성을 확인하십시오. 신호의 소실은 인산화 의존성을 확인해 줍니다.
• 웨스턴 블랏(Western blot)의 경우, 포르볼 에스테르(Phorbol ester)로 자극한 호중구 또는 HL-60 세포 용해물과 같은 양성 대조군을 사용하여 항체 희석 배율을 최적화하십시오. 인산화를 유지하기 위해 용해 완충액에 인산가수분해효소 억제제를 포함시키십시오.
• ELISA의 경우 인산화 펩타이드 면역원으로 코팅하고 비인산화 대조군과 결합력을 비교하여 특이성을 평가하십시오.
• 인산화 수준을 단백질 양으로 정규화하기 위해 막 스트리핑 후 전체(total) NCF4 항체로 리프로빙(reprobing)하는 것을 고려하십시오.

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