WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-Phospho-NF-kB p65/RelA (S536) 단일클론 항체 - Q04206

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: NF-κB p65/RelA의 기능 및 위치

• RELA는 전사 인자 p65(핵 인자 NF-kappa-B p65 서브유닛으로도 알려짐)를 암호화하며, 이는 NF-κB 복합체의 중심 서브유닛입니다.
• NF-κB는 염증, 면역, 세포 성장, 분화, 종양 형성 및 세포사멸에 관련된 유전자를 조절하는 다능성 전사 인자로, 다양한 자극에 의해 활성화됩니다.
• p65는 다른 Rel 단백질과 동종 또는 이종 이합체를 형성합니다. RELA-NFKB1 이종이합체가 가장 풍부하며 전사를 활성화합니다.
• 휴지기 세포에서 NF-κB는 IκB 억제제에 의해 세포질에 보유됩니다. 활성화 시 IκB가 분해되며, NF-κB가 핵으로 이동하여 DNA에 결합할 수 있게 됩니다.
• 전사활성화 도메인의 세린 536(S536)에서의 인산화는 전사 활성화를 강화하며 NF-κB 경로 활성화의 마커로 작용합니다.
• p65는 핵과 세포질 모두에 위치하며, 신호에 따라 셔틀링합니다.
• p65는 기능을 조절하는 다양한 번역 후 변형(인산화, 아세틸화, 메틸화, 유비퀴틴화, S-니트로실화)을 겪습니다.
• p65는 T-세포에서 사이토카인 유전자 발현에 필수적이며, SARS-CoV-2 감염 중 인터페론 반응을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:15790681, PMID:33440148

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 S536 주변의 합성 인산화 펩타이드입니다. 실험에서 인산화 특이성을 확인하기 위해 비인산화 펩타이드 대조군 사용을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우, 약 65 kDa의 주요 밴드가 예상됩니다. 활성화 의존적 인산화를 확인하기 위해 자극된 세포와 자극되지 않은 세포 용액에서 검출을 검증하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우, 적절한 투과화 처리를 포함시키고, 이동을 시각화하기 위해 총 p65 항체 또는 핵 마커와의 공동 염색을 고려하십시오.
• ELISA 프로토콜은 인산화-p65를 포착하기 위해 이 항체를 사용할 수 있습니다. 특정 샘플 매트릭스에 대한 코팅 및 검출 조건을 최적화하십시오.

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