IF/ICC용 Anti-Phospho-NFKB1-S893 Rabbit Polyclonal Antibody - P19838

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: NFKB1 기능 및 위치

• NF-κB는 염증, 면역, 분화, 세포 성장, 종양 형성 및 세포사멸을 포함한 광범위한 생물학적 과정을 조절하는 다능성 전사 인자로, 거의 모든 세포 유형에서 발현됩니다.
• NFKB1 유전자는 이중 기능을 하는 p105 전구체 단백질을 암호화합니다: 이는 NF-κB 복합체에 대한 세포질 보유 인자 역할을 하며, 동시에 활성 p50 소단위체를 생성하기 위해 공동 번역 후 가공을 거칩니다.
  관련 참고문헌: PMID:1423592
• 활성 p50 소단위체는 주로 RELA/p65와 이종이합체를 이루어 전사 능력이 있는 NF-κB 복합체를 형성하며, 이 복합체는 면역 및 급성기 반응 관련 유전자의 인핸서 영역에 있는 합의 κB DNA 서열 5'-GGRNNYYCC-3'에 결합합니다.
  관련 참고문헌: PMID:1740106, PMID:7830764
• 이합체 구성에 따라 NF-κB 복합체는 전사 활성제(예: p65-p50) 또는 억제제(예: p50-p50 동종이합체) 역할을 하여 유전자 발현을 정밀하게 조절할 수 있습니다.
• 자극을 받지 않은 세포에서 NF-κB는 IκB 억제 단백질에 의해 세포질에 격리되어 있습니다. 다양한 자극에 의해 활성화되면 IκB가 인산화되고 분해되어 NF-κB의 핵 내 이동이 가능해집니다.
• NFKB1 단백질은 인산화, 아세틸화, 하이드록실화, S-나이트로실화 및 유비쿼틴화를 포함한 광범위한 번역 후 변형을 받으며, 이는 그 활성, 안정성 및 단백질 상호작용을 조절합니다.
• 세린 893(S893)에서의 인산화는 일반적으로 p50으로의 프로테아좀 가공 과정에서 제거되는 영역인 p105의 C-말단 IκB 유사 도메인 내에서 발생하며, 이는 p105의 세포질 보유 또는 가공 역학에서 조절 역할을 시사합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 NFKB1의 S893 주변 잔기에 해당하는 합성 인산화 펩타이드로, 이 항체가 이 부위에서 인산화된 NFKB1 형태를 특이적으로 인식함을 나타냅니다.
• 면역세포화학/면역형광(ICC/IF)의 경우, 인산화 상태를 보존하는 적절한 고정 및 투과화 프로토콜을 사용하는 것을 권장합니다. 메탄올 또는 파라포름알데히드 고정이 적합할 수 있으나, 인산가수분해효소 억제제 유무를 확인하여 테스트하십시오.
• 항체 특이성을 확인하기 위해 항체를 인산화 펩타이드 면역원과 사전 배양하거나, 염색 전 세포를 인산가수분해효소로 처리하여 검증하십시오.
• S893 인산화 부위는 p105의 C-말단 IκB 유사 도메인에 위치합니다. 이 도메인은 성숙한 p50 소단위체를 생성하는 프로테아좀 가공 과정에서 분해됩니다. 따라서 이 항체는 인산화된 p105(~105 kDa)를 검출할 것으로 예상되며, 절단된 p50 생성물은 검출하지 않습니다.
• 교차 반응성이 인간에 대해서만 입증되었으므로, 관련 인간 세포주 또는 조직에서 항체를 검증하십시오. 발현 수준은 세포 유형 및 자극 조건에 따라 다를 수 있습니다.

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