웨스턴 블롯, ELISA용 항인 PAK2 (S20) 인산화 토끼 단클론 항체 - Q13177

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: PAK2의 기능과 위치

• 세린/트레오닌 단백질 키나아제 PAK2는 PAK65, 감마-PAK, p58로도 알려져 있으며 p21 활성화 키나아제(PAK) 패밀리의 구성원입니다.
• 소형 GTPase인 CDC42와 RAC1의 다운스트림 효과기로 작용하며, 결합은 자가인산화와 키나아제 활성화를 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:7744004
• 뉴클레오좀 조립을 촉진하기 위해 히스톤 H4, EGF 유도 증식을 위해 JUN, F-액틴 중합을 조절하기 위해 MAPK4/6를 포함한 다양한 기질을 인산화합니다. 관련 참고문헌: PMID:21724829, PMID:21177766, PMID:21317288
• 카스파아제 매개 절단은 PAK-2p34를 생성하며, 이는 핵으로 전위되고 JNK 신호를 통해 아폽토시스를 촉진합니다; 또한 MKNK1을 인산화하여 세포 번역을 감소시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063, PMID:15234964
• 세포질, 핵, 핵주변 영역 및 막에 위치하며, ARHGEF7 및 GIT1과 결합 시 유사분열 방추 배향에서 키나아제 비의존적 기능을 발휘합니다. 관련 참고문헌: PMID:19273597, PMID:19923322
• 골격근, 난소, 흉선 및 비장에서 더 높은 수준으로 널리 발현되며; 아세틸화, 미리스토일화 및 유비퀴틴 접합에 의해 번역 후 변형됩니다.
• 또한 CASP7을 인산화하고 억제하여 아폽토시스를 예방합니다. 관련 참고문헌: PMID:21555521, PMID:27889207

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원이 세린 20 주변의 합성 인산화 펩타이드이므로, 이 항체는 S20에서 인산화된 PAK2를 특이적으로 인식할 것으로 예상됩니다; 인산화를 보존하기 위해 시료 준비 시 포스파타아제 저해제를 사용하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우, PAK2를 발현하는 인간 세포주에서 검증하고 ~58 kDa에서 밴드를 확인하십시오; 마우스 및 래트와의 교차 반응성은 이러한 종에서의 연구를 가능하게 하지만, S20 주변 서열 상동성을 확인해야 합니다.
• ELISA에서는 인산화 특이성을 검증하기 위해 비인산화 펩타이드 대조군을 사용하십시오.
• 인산화 의존성을 확인하기 위해 적절한 대조군(예: 비처리 대 포스파타아제 처리 용해물)을 포함하십시오.
• 최적 작업 희석비는 경험적으로 결정해야 합니다; 가능한 경우 제조업체 권장 사항부터 시작하십시오.

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