WB, ELISA용 항인 PKC 알파-T638 인 포스포 토끼 단일클론 항체 - P17252

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PKC 알파 기능 및 세포 내 위치

• 단백질 키나아제 C 알파 타입(PKCα)은 칼슘 활성화, 인지질 및 디아실글리세롤(DAG) 의존성 세린/트레오닌 단백질 키나아제로, 증식, 세포자멸사, 분화, 이동, 부착 및 혈관 신생을 포함한 다양한 세포 과정을 조절합니다.
• PKCα는 세포 주기 진행의 양성 및 음성 조절 모두에서 작용합니다; RAF1/MAPK/ERK 신호 전달을 통해 성장을 촉진하거나 RB1 과인산화 및 CDK 저해제 유도(CDKN1A, CDKN1B)를 통해 세포 주기 정지를 유도할 수 있습니다.
• 이 키나아제는 p53/TP53 매개 IGFBP3 활성화를 억제하고 BCL2를 인산화시켜 암 세포에서 항세포자멸사 기능을 나타내므로 교모세포종과 유방암에서 종양 촉진에 기여합니다.
• PKCα는 심혈관 생물학에서 중요한 역할을 합니다: 심근 수축력을 음성 조절하고, ERK1/2 신호 전달을 통해 심근세포 비대를 유도하며, 내피세포 이동과 VEGFA 유도 증식을 강화하여 혈관 신생을 촉진합니다.
• 혈소판 기능에서 PKCα는 RAP1GAP 경로를 통해 CD36/GP4 의존성 과립 방출과 인테그린 ITGA2B-ITGB3 활성화를 매개하여 혈전 형성에 기여합니다.
• 이 키나아제는 대식세포 분화와 케모카인 유도 T 세포 이동을 포함한 면역 반응에 관여하며; DOCK8를 인산화시켜 CDC42 활성화를 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:28028151
• PKCα의 세포 내 국소화는 동적입니다: 활성화 상태와 자극에 따라 세포질, 세포막, 미토콘드리아 막 및 핵에서 발견됩니다.
• PKCα는 심장 수축력을 조절하는 TNNT2/CTNT, 안지오텐신 II에 반응하여 WNK4 안정성을 조절하는 KLHL3, 세포 내 수송에 관여하는 LRRK1을 포함한 다양한 기질을 인산화시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:25313067 PMID:36040231

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 PKCα의 Thr638를 포함하는 합성 포스포펩타이드입니다; 인산화 형태에 대한 항체 특이성은 탈인산화효소 처리된 샘플과 처리되지 않은 샘플의 신호를 비교하여 검증해야 합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 77 kDa 단백질을 분리하기 위해 낮은 비율의 SDS-PAGE 겔을 사용하는 것을 고려하고, 총 단백질 수준을 평가하기 위해 비인 특이적 PKCα 항체와 함께 적절한 로딩 대조군을 포함하십시오.
• ELISA 적용 시 코팅 항체 농도와 블로킹 조건을 경험적으로 조사하십시오; 포스포펩타이드 경쟁 분석은 포스포 특이적 결합을 확인하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• PKCα 활성화는 일시적이고 자극 의존적이므로 세포 자극 프로토콜(예: PMA, 성장 인자)을 최적화하고 인산화효소 저해제를 사용하여 적시에 샘플을 준비하십시오.

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