WB, IP, ELISA용 인산화-POLR2A CTD-S2 다클로널 항체 - P24928

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: POLR2A (DNA 지향성 RNA 폴리머라제 II 서브유닛 RPB1) 기능 및 국재화

• POLR2A는 mRNA 전구체와 많은 기능성 비코딩 RNA를 합성하는 DNA 의존성 RNA 폴리머라제인 RNA 폴리머라제 II (Pol II)의 가장 큰 촉매 서브유닛을 암호화합니다 (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474). 관련 참고문헌: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• 두 번째로 큰 서브유닛인 POLR2B와 함께 Pol II 활성 중심을 형성하여 생성 중인 RNA에 뉴클레오타이드를 추가하고 3'->5' 엑소뉴클레아제 활성을 통해 교정 기능을 제공합니다 (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). 관련 참고문헌: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• 독특한 C-말단 도메인(CTD)은 52개의 연속된 헵타펩타이드 반복(YSPTSPS)으로 구성되며, 전사 개시, 신장, 종결 및 동시 전사 mRNA 처리를 조절하는 인자의 조립을 위한 동적 플랫폼 역할을 합니다. Ser5의 인산화는 프로모터 탈출을 촉진하는 반면, Ser2의 인산화는 일시 정지 해제 및 생산적 신장에 중요합니다 (PubMed:24207025, PubMed:26124092). 관련 참고문헌: PMID:24207025 PMID:26124092
• DNA 의존성 RNA 폴리머라제 활성 외에도 POLR2A는 RNA 의존성 RNA 폴리머라제 기능을 가지고 있어 비코딩 RNA를 확장하고 바이러스 복제(예: 델타 간염 바이러스)에 참여합니다.
• POLR2A의 번역 후 수정에는 인산화, 아세틸화, 메틸화 및 유비퀴틴화가 포함되며, 이는 활성과 상호작용을 정교하게 조절합니다.
• POLR2A는 주로 핵에 국재하지만 세포질에서도 발견될 수 있으며 염색체와 관련되어 있어, 이는 전사 및 그 이상의 역할을 반영합니다.
• 계산된 분자량은 약 217 kDa입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 POLR2A CTD 반복 서열의 Ser2에 해당하는 합성 인산화 펩타이드입니다. 항체 특이성은 인산가수분해효소 처리된 용해물 또는 비인산화 차단 펩타이드를 사용하여 확인해야 합니다.
• 웨스턴 블로팅 애플리케이션의 경우, 인산화 신호를 유지하기 위해 용해 및 샘플 버퍼에 적절한 인산가수분해효소 억제제를 포함하십시오.
• 면역침전을 수행할 때 용해 버퍼 구성이 인산화 에피토프의 완전성을 유지하도록 하십시오. 용해물을 미리 투명하게 만들면 비특이적 결합을 줄일 수 있습니다.
• ELISA의 경우 면역 인산화 펩타이드로 코팅하고 이 항체로 검출하여 인산화 특이적 결합을 평가할 수 있습니다. 비인산화 펩타이드 대조군과의 교차 반응성을 고려하십시오.
• 이 항체는 유사한 인산화 모티프를 가진 다른 단백질도 인식할 수 있습니다. 관련 샘플 시스템에서 검증하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브리지

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