Anti-Phospho-POLR2A CTD-S5 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IHC-P, ELISA - P24928

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: POLR2A (RPB1) 기능 및 위치

• RNA 폴리머라제 II의 가장 큰 소단위체로서, POLR2A/RPB1은 DNA 의존적 RNA 합성을 담당하는 촉매 중심부를 형성하며, mRNA 전구체와 비코딩 RNA를 전사합니다 (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596). 관련 참고문헌: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596

• 소단위체 POLR2B/RPB2와 함께, Mg2+ 조정 DxDGD 모티프를 특징으로 하는 활성 중심부를 형성하고 3'→5' 엑소뉴클레아제 교정 기능을 제공하여 전사 충실도를 보장합니다 (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). 관련 참고문헌: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112

• C-말단 도메인(CTD)은 52개의 탠덤 헵타펩타이드 반복(YSPTSPS)으로 구성되며 동적 인산화를 겪습니다: Ser5 인산화(본 항체의 표적)는 프로모터 이탈을 촉진하는 반면, Ser2 인산화는 신장 및 mRNA 프로세싱을 촉진합니다 (PubMed:24207025, PubMed:26124092). 관련 참고문헌: PMID:24207025 PMID:26124092

• DNA 의존적 역할 외에도, POLR2A는 RNA 의존적 RNA 폴리머라제 활성을 나타내어 비코딩 RNA 대사에 기여하고 B형 간염 델타 바이러스의 복제효소 역할을 합니다.

• 주로 핵에 위치하지만, POLR2A는 또한 세포질로 왕래하며 유사분열 염색체와 결합하여 다면적 조절 역할을 반영합니다.

• POLR2A의 돌연변이는 저긴장성, 지적 장애 및 특징적인 안면 특징을 동반한 신경발달 장애(NEDHIB)와 연관되어 있어 인간 발달에서의 필수적 역할을 강조합니다.

• 라이신 잔기의 아세틸화 및 메틸화를 포함한 CTD의 번역 후 변형은 유전자 발현에 대한 추가적인 조절 계층을 제공하며, 아세틸화는 즉시 초기 유전자 활성화에 중요합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 CTD 반복 서열 내 인산화된 Ser5 잔기를 특이적으로 인식하도록 설계된 합성 펩타이드입니다. 비인산화 펩타이드 또는 다른 인산화 에피토프(예: Ser2, Ser7)와의 교차 반응성은 관련 샘플 시스템에서 평가해야 합니다.
• 웨스턴 블롯(WB) 분석의 경우, 전장 POLR2A에 해당하는 ~217 kDa의 주요 밴드가 예상됩니다. 인산화 에피토프를 보존하기 위해 용해 및 전기영동 완충액에 포스파타제 억제제를 포함시키세요.
• 면역조직화학(IHC-P)에서, 항원 검색 방법은 인산화 에피토프 안정성에 영향을 줄 수 있습니다. 온화한 시트르산 또는 EDTA 기반 프로토콜을 테스트하고 적절한 양성 및 음성 인산화 대조군으로 검증하세요.
• ELISA 응용의 경우, 인산화 펩타이드로 코팅하고 항체의 인산화 항원에 대한 특이성을 유지하는 조건 하에서 차단해야 할 수 있습니다.
• 교차 반응성은 인간, 마우스 및 랫트 샘플에 대해 보고되었습니다. 그러나 CTD 반복 서열이 매우 보존되어 있으므로 필요한 경우 서열 정렬을 통해 특정 모델 생물에서 특이성을 확인하세요.

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