WB, IHC-P, ELISA, ChIP용 항인 PPOLR2A CTD-S7 토끼 pAb - P24928

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: POLR2A 기능 및 국소화

• POLR2A는 RPB1 또는 POLR2라고도 알려져 있으며, mRNA 전구체와 많은 기능성 비코딩 RNA 합성을 담당하는 DNA 의존성 RNA 중합효소인 RNA 중합효소 II(Pol II)의 가장 큰 서브유닛입니다.
• 두 번째로 큰 서브유닛인 POLR2B와 함께 촉매 코어를 형성하며, 뉴클레오타이드 중합을 위해 Mg²⁺-배위 DxDGD 모티프를 사용하고 교정 교정을 위해 3'→5' 엑소뉴클레아제 활성을 이용합니다. 관련 참고문헌: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112
• 고유한 C-말단 도메인(CTD)은 52개의 탠덤 헵타펩타이드 반복(YSPTSPS)으로 구성되며 전사 조절인자를 위한 플랫폼 역할을 합니다. Ser5의 인산화는 프로모터 이탈을 촉진하는 반면, Ser2 인산화는 일시 중지 해제 및 신장에 필요합니다. 관련 참고문헌: PMID:24207025, PMID:26124092
• CTD 리신 아세틸화는 성장인자 유발 즉각 초기 유전자를 활성화하는 반면, 메틸화 및 이메틸화는 표적 유전자 발현을 억제하여 전사 산출을 미세 조정합니다. 관련 참고문헌: PMID:24207025, PMID:26124092
• POLR2A는 주로 핵에 위치하지만 전사에서의 동적 역할과 일치하게 세포질과 염색체에서도 검출됩니다.
• 비코딩 RNA를 연장하는 RNA 의존성 RNA 중합효소로 작용하며 D형 간염 바이러스의 복제효소로 기능할 수 있습니다.
• POLR2A와 연관된 키워드에는 인단백질, 아세틸화, 메틸화, DNA 결합, 금속 결합, 전사, 숙주-바이러스 상호작용 및 질환 변이체가 포함되며 복잡한 조절 기능을 반영합니다.
• POLR2A의 돌연변이는 지적 장애(NEDHIB)와 같은 신경발달 장애와 연관되어 있습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯의 경우 217 kDa 단백질의 효율적인 이적을 보장하기 위해 저농도 SDS-PAGE 겔(예: 6% 또는 구배)과 습식 이적을 사용하십시오.
• S7 인산화 신호를 보존하기 위해 용해 완충액에 포스파타아제 저해제 칵테일을 추가하고, 음성 대조군으로 비인 펩타이드 또는 포스파타아제 처리된 샘플을 사용하는 것을 고려하십시오.
• IHC-P에서는 항원 회수 조건(시트르산 또는 EDTA 기반 완충액)을 최적화하고 신호를 증폭하기 위해 중합체 검출 시스템을 사용하십시오.
• ELISA의 경우 특이성을 확인하기 위해 양성 대조군으로 인 펩타이드를 사용하고 대응되는 비인 펩타이드를 사용하십시오.
• ChIP에서는 단백질을 DNA에 가교 결합시키고 염색질을 200~500 bp 단편으로 전단하십시오. 이 항체는 활발히 전사되는 유전자의 프로모터에서 Pol II를 농축시킬 수 있습니다.
• 대규모 실험 전에 관련 종 및 조직 환경에서 항체 성능을 검증하십시오.

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