WB, ELISA용 Anti-Phospho-Raf1-S621 토끼 단일클론 항체 - P04049

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: RAF1 (c-Raf) 기능 및 국소화

• RAF1(c-Raf 또는 Raf-1로도 알려짐)은 막 관련 Ras GTPase와 MAPK/ERK 캐스케이드 사이의 중요한 조절 링크로 작용하는 세린/트레오닌 단백질 키나제로, 증식, 분화, 세포 사멸(apoptosis), 생존을 포함한 세포 운명 결정을 제어하는 스위치 역할을 합니다.
• 이 키나제는 이중 특이성 MAPK 키나제(MAP2K1/MEK1 및 MAP2K2/MEK2)와 세포 외 신호 조절 키나제(MAPK3/ERK1 및 MAPK1/ERK2)를 순차적으로 인산화하여 유발된 미토겐 활성화 단백질 키나제(MAPK) 캐스케이드를 시작합니다.
• RAF1은 다양한 기질을 인산화합니다: BAD (Ser-75, PAK1 경유), 아데닐산 사이클라제(ADCY2, ADCY5, ADCY6), PPP1R12A (인산가수분해효소 활성 억제), TNNT2; 또한 NF-κB 활성화를 촉진하고 ROCK2, ASK1, MST2 키나제를 억제합니다.
• 이 단백질은 미토콘드리아로 이동하여 BCL2에 결합하고 BAD를 치환함으로써 세포 사멸로부터 세포를 보호할 수 있습니다. 또한 Fas 자극, 병원체 매개 대식세포 세포 사멸 및 적혈구 분화에 대한 반응에서 카스파제 활성화를 제한합니다.
• RAF1은 전역 억제 인자 SNAI2/SLUG의 상향 조절을 유도하여 타이트 접합 단백질 오클루딘(OCLN)을 억제함으로써 발암성 변형에 기여합니다.
• 세포 내 국소화에는 세포질, 세포막, 미토콘드리아, 및 핵이 포함되며, 이는 다면적인 조절 역할을 반영합니다.
• 이 단백질은 아연 집합 도메인을 특징으로 하며 ATP에 결합하고, 인산화(예: S621), 메틸화, 및 대안 스플라이싱(이소폼 1은 골격근에서 더 풍부함)의 대상이 됩니다.
• RAF1과 관련된 키워드에는 심근병증, 난청, 질병 변이, 원발암 유전자, 및 세린/트레오닌 단백질 키나제가 포함되며, 정상 생리 및 질병 모두에 관여함을 나타냅니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 합성 인산화 펩타이드입니다. 인산화 상태를 유지하기 위해 용해 및 제조 중에 인산가수분해효소 억제제로 샘플을 처리하십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우 약 73 kDa에서 밴드가 나타나기를 기대하십시오. 인산화 특이성을 확인하기 위해 인산가수분해효소 처리된 용해물 또는 자극된 세포와 비자극된 세포와 같은 적절한 대조군을 포함하십시오.
• RAF1 인산화는 역동적이므로, 신호를 정규화하고 활성화 변화를 정확하게 해석하기 위해 총 RAF1 항체를 병렬로 사용하는 것이 좋습니다.
• ELISA의 경우 코팅 항원 농도와 항체 희석 배율을 최적화하십시오. 알려진 인산화 펩타이드를 사용한 표준 곡선은 정량화에 도움이 될 수 있습니다.
• 쥐(Rat) 조직과의 교차 반응성이 보고되었습니다. 신호 강도는 샘플마다 다를 수 있으므로 특정 쥐 모델 시스템에서 항체 성능을 검증하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브리지

CamelBio은 진단 기기 제조사, 연구소 및 연구소에 컨셉에서 임상에까지 이르는 모든 단계를 포괄하는 IVD 원자재, 기술 서비스 및 컨설팅에 대한 원스스톱 액세스를 제공합니다. RAS-RAF-MEK-ERK 신호 축에 초점을 맞춘 연구의 경우, 우리는 검증된 항체 쌍, 최적화된 단일클론 및 다클론 항체, 대량 보조 시약, 및 희귀 표적 원자재 소싱을 포함하는 포괄적인 포트폴리오를 제공하여 분석 개발을 가속화합니다.