Anti-Phospho-Raf1 (Ser621) Rabbit Polyclonal Antibody - P04049

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: RAF1 기능 및 국소화

• RAF1(c-Raf 또는 Raf-1이라고도 함)은 RAF1 유전자에 의해 암호화된 세린/트레오닌 단백질 키나아제입니다. 이는 막 관련 Ras GTPase와 MAPK/ERK 신호 전달 캐스케이드 사이의 중요한 조절 링크로 기능하며, 증식, 분화, 세포자멸사 및 암성 형질전환과 같은 핵심 세포 과정을 제어합니다.
• 활성화된 RAF1은 이중 특이성 키나아제인 MAP2K1/MEK1 및 MAP2K2/MEK2를 인산화하여 활성화하며, 이는 다시 세포 외 신호 조절 키나아제인 MAPK3/ERK1 및 MAPK1/ERK2를 인산화하여 하류 신호를 전달합니다.
• 정규 MAPK 경로 외에도 RAF1은 BAD(Ser-75), 아데닐산 사이클라제(ADCY2, ADCY5, ADCY6), PPP1R12A 및 TNNT2를 포함한 여러 다른 기질을 인산화하여, 세포자멸사 조절 및 cAMP 신호 전달과 같은 다양한 세포 기능과 연결됩니다.
• RAF1은 세포질, 세포막, 미토콘드리아 및 핵에 위치합니다. 미토콘드리아로의 이동은 BCL2와의 결합 및 BAD의 방출을 가능하게 하여 추가적인 항세포자멸사 메커니즘을 제공합니다.
• 골격근에서 RAF1의 아이소폼 1은 아이소폼 2보다 더 풍부하여 조직 특이적 조절 역할을 시사합니다.
• RAF1은 다양한 암과 관련된 원암유전자(proto-oncogene)입니다. 그 조절 활동의 이상은 SNAI2/SLUG의 상향 조절을 통해 오클루딘(occludin)과 같은 타이트 접합 단백질을 억제함으로써 암성 형질전환을 촉진합니다.
• 이 단백질은 아연 집게 도메인을 포함하며, 키나아제 활성과 세포 내 분포를 엄격하게 조절하는 인산화를 포함한 다양한 번역 후 변형의 대상입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 인간 RAF1의 Ser621에 해당하는 합성 인산화 펩타이드에 대해 생성되었습니다. 이 잔기에서 인산화된 RAF1을 특이적으로 인식할 것으로 예상됩니다. 전체 RAF1 검출을 위해서는 대조군으로 범용 항체(pan-antibody)가 필요할 수 있습니다.
• 웨스턴 블랏의 경우 표준 프로토콜을 사용하되, 인산화를 유지하기 위해 용해 및 배양 버퍼에 인산가수분해효소 억제제를 포함해야 합니다. 적절한 인간 샘플에서 73 kDa 근처의 밴드 검출이 예상됩니다.
• 면역침전의 경우 실험 시스템에 맞게 항체 농도와 배양 시간을 최적화하십시오. 프리 클리어링(pre-clearing) 및 적절한 이소타입 대조군을 권장합니다.
• ELISA의 경우 이 항체는 포획(capture) 또는 검출(detection)에 사용할 수 있습니다. 인산화 및 비인산화 펩타이드 대조군으로 결합 친화도와 특이성을 검증하십시오.
• 항상 특정 샘플 매트릭스 및 실험 조건에서 항체를 검증하십시오. 성능은 세포 유형 및 자극 상태에 따라 달라질 수 있습니다.

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