Anti-Phospho-RPA2-Ser33 Rabbit Monoclonal Antibody for WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P15927

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 복제 단백질 A 32 kDa 서브유닛의 기능 및 국소화

• RPA2는 RPA1 (70 kDa) 및 RPA3 (14 kDa)를 포함하는 이종 삼량체 복제 단백질 A (RPA) 복합체의 32 kDa 서브유닛입니다. 복제 인자 A 단백질 2 (RF-A protein 2) 및 RP-A p34라고도 불립니다.
• RPA 복합체는 DNA 복제 중 및 DNA 손상 후 단일 가닥 DNA (ssDNA)에 결합하여 안정화하고, 재결합을 방지하며 DNA 대사에 관여하는 주요 단백질을 모집합니다.
• DNA 손상 반응에서 RPA2는 체크포인트 신호 전달의 주요 조절자인 ATR 키나아제를 활성화하는 ATRIP의 모집을 촉진합니다.
• RPA2는 DNA 손상 부위의 염색질로 RAD51, RAD52, XPA 및 XPG와 같은 DNA 복구 인자의 모집에 필수적이며, 상동 재조합 및 뉴클레오타이드 절제 복구를 가능하게 합니다.
• 이 복합체는 UNG와의 상호작용을 통해 염기 절제 복구 (BER)에 역할을 하며, BRIP1/FANCJ의 5'-3' 헬리카제 활성을 자극하여 복제 포크(replication fork)의 재시작을 촉진할 가능성이 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:17596542
• RPA2는 주로 핵에 국소화되며 PML 핵 소체(nuclear bodies)에서 발견될 수 있습니다.
• Ser33 인산화, 아세틸화 및 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 DNA 복구 및 복제에서 RPA2의 기능을 조절합니다.
• RPA2의 대안 스플라이싱(alternative splicing)은 여러 이소폼을 생성하며 기능적 다양성에 기여합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 처리된 샘플과 처리되지 않은 샘플 간의 신호를 비교하거나 람다 인산화 효소(lambda phosphatase) 처리를 사용하여 인산화 특이성을 검증하십시오.
• 면역형광법(IF-P) 및 면역조직화학(IHC-P)의 경우, 인산화 에피토프를 보존하기 위해 고정 및 투과화 조건을 최적화하십시오. 과도한 고정은 표적을 가릴 수 있습니다.
• ELISA를 사용할 때는 단백질 로딩량을 정규화하고 인산화 화학량론을 평가하기 위해 이 인산화 특이 항체를 전체(total) RPA2 항체와 페어링하는 것을 고려하십시오.
• 마우스 및 래트 RPA2와 교차 반응하지만, 일관된 인식을 보장하기 위해 해당 종에서 Ser33 주변의 서열 상동성을 확인하십시오.

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