WB 및 ELISA용 항인 Phospho-Syk (Y525/526) 토끼 다클론 항체 - P43405

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: SYK 기능 및 세포 내 위치

• SYK(비장 타이로신 키나아제)는 다양한 막관통 수용체 하류에서 신호전달을 매개하는 비수용체 타이로신 키나아제로, 선천성 및 적응성 면역, 세포 접착, 파골세포 성숙, 혈소판 활성화 및 혈관 발달을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:12387735 PMID:33782605
• B세포 수용체(BCR) 신호전달에 필수적인 SYK는 전B세포에서 전전B세포로 전환되는 과정에서 B세포 성숙에 필요합니다. 관련 참고문헌: PMID:12456653
• BCR 결합 시 SYK는 BLNK와 같은 주요 어댑터 단백질과 PLCG1과 같은 이펙터 단백질을 인산화시켜, 활성화된 수용체를 칼슘 동원 및 PKC 신호전달 경로와 연결합니다.
• 선천성 면역계에서 곰팡이 자극 시 C형 렉틴 수용체(예: CLEC7A)에 의해 SYK가 활성화되어 ROS 생성, 인플라좀 활성화 및 NF-κB 매개 사이토카인 전사를 유발합니다.
• IL-15로 자극된 호중구 탐식 작용에 SYK가 필요하며, 이는 골수세포 기능에서의 역할을 강조합니다. 관련 참고문헌: PMID:15123770
• 아세포 내에서 SYK는 세포막, 세포질 및 세포액에 위치하며 활성화된 수용체로 동적으로 이동합니다.
• 조혈세포에서 널리 발현되며, B세포 계열(전B세포부터 형질세포까지)과 호중구에서 뚜렷한 발현을 보입니다. 관련 참고문헌: PMID:8163536
• 번역 후 변형으로는 활성 루프의 타이로신 잔기 525 및 526에서의 자가인산화와 유비퀴틴화가 포함되며, 이는 키나아제 활성과 단백질 안정성을 조절합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 이 항체는 Tyr525 및 Tyr526의 인산화를 특이적으로 인식하므로, 인산화 상태를 유지하기 위해 세포 용해물 제조 시 포스파타아제 저해제를 첨가해야 합니다. 웨스턴 블롯의 경우 람다 포스파타아제 처리 또는 자극 조건과 비자극 조건을 비교하여 신호를 검증하십시오.
• ELISA 수행 시 인산화 특이성을 확인하기 위해 인산화 펩타이드를 코팅 항원으로 사용하고 비인산화 대조군 펩타이드를 함께 사용하는 것을 고려하십시오.
• WB에서 최적의 항체 희석비는 실험적으로 결정해야 하며, 다클론 항체의 일반적인 시작 희석비는 1:500 ~ 1:2000 범위입니다.
• 면역원 설계상 다른 종과의 교차반응성은 예상되지 않으나, 실험적으로 검증되지 않았습니다.

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