Anti-Phospho-Zap70-Y319+Syk-Y352 토끼 다클로날 항체 (WB, IF/ICC, ELISA용) - P43403/P43405

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: ZAP70 기능 및 국소화

• ZAP70 (70 kDa 제타-체 연관 단백질)는 Syk 패밀리에 속하는 세포질 티로신 키나제이며, Syk 관련 티로신 키나제(SRK)라고도 합니다.
• T세포 수용체(TCR) 신호 전달에 필수적임: TCR 결합 시 ZAP70은 CD3 사슬의 인산화된 ITAM 모티프로 모집되며, 여기서 LCK에 의해 인산화되고 활성화되어 하류 신호 전달 캐스케이드를 시작합니다. 관련 참고문헌: PMID:7509083
• 활성화된 ZAP70은 어댑터 단백질인 LAT와 LCP2를 인산화하여 T세포 활성화, 증식, 사이토카인 생성 및 분화를 조절하는 신호 네트워크를 촉발합니다.
• TCR 신호 전달 외에도 ZAP70은 T세포 부착, 운동성 및 세포골격 재구성을 제어합니다. 또한 CBL, SLA 및 SLA2와의 상호작용을 통해 TCR 내재화 및 분해를 매개하여 표면 TCR 수준을 조절합니다.
• ZAP70은 또한 B세포 수용체(BCR) 신호 전달을 통해 B세포 발달 및 활성화에 기여합니다.
• 흉선세포 발달 과정에서 ZAP70은 양성 선택 이전 CD4/CD8 이중 음성(double-negative) 흉선세포의 생존 및 세포 주기 진행을 촉진합니다.
• 세포 내 국소화: 주로 세포질에 존재하지만 TCR 자극 시 세포막으로 이동합니다.
• 조직 발현: 주로 T세포와 자연 살해(NK) 세포에 있으며, 초기 흉선세포 및 pro/pre B세포에는 낮은 수준으로 존재합니다.
• 주요 특징으로는 인산화된 ITAM에 결합하는 N-말단 tandem SH2 도메인, ATP 결합 부위가 있는 키나제 도메인, 활성을 조절하는 다중 인산화 부위(예: Y319)가 포함되며, 인산단백질, 대안 스플라이싱, 질병 변이와 같은 키워드로 주석이 달려 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 ZAP70의 Y319 주변 합성 인산화 펩타이드이며, 인산화 부위 주변의 서열 유사성으로 인해 해당 항체는 Syk의 인산화된 Y352도 인식합니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우, 강력한 인산화를 유도하기 위해 항-CD3 또는 페르바나데이트(pervanadate)로 자극한 T세포주의 용해물을 사용하는 것이 좋습니다. 인산화 특이성을 확인하기 위해 탈인산화 대조군(예: λ-포스파타제 처리)을 포함하십시오.
• 면역형광법/ICC의 경우, 인산화 에피토프와 세포 구조 모두를 보존하기 위해 고정 및 투과화 조건을 최적화하십시오. 활성화 상태를 평가하기 위해 전체(total) ZAP70 항체로 대비 염색(counterstain)을 수행하십시오.
• ELISA의 경우 인산화 펩타이드 코팅 항원을 사용할 수 있습니다. 비특이적 결합을 최소화하기 위해 블로킹 단계를 확인하십시오.
• 마우스와의 교차 반응성을 통해 마우스 T세포 모델에서 검출이 가능하지만, 특정 실험 시스템에서 반응성을 검증해야 합니다.
• ZAP70의 예상 분자량은 약 70 kDa이며, Syk의 경우 약 72 kDa 이소형을 검출합니다. WB에서 이는 해상도에 따라 인접한 밴드 또는 단일 밴드로 나타날 수 있습니다.

CamelBio: 원스톱 소싱 브리지

원스톱 IVD 원자재 소싱 파트너로서 CamelBio는 진단 제조사 및 연구소에 신뢰할 수 있는 항체 페어, 대량 보조 시약, 면역 신호 표적용 맞춤형 조달 솔루션을 제공합니다. 이 인산화-Zap70/Syk 항체는 T세포 및 B세포 활성화 경로에 대한 조사를 지원하며, 우리는 개념부터 임상까지 검법 개발을 간소화하기 위한 보완적인 전체 단백질 항체, 블로킹 버퍼 및 희귀 표적 소싱을 제공합니다.