Anti-Phospho-ZAP70 (Y493) Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P43403

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: ZAP70 기능 및 위치

• ZAP70 (70 kDa zeta-chain associated protein)는 적응 면역 조절에 필수적인 세포질 티로신 키나제로, 항원 제시 시 T-세포 수용체(TCR) 신호전달을 매개합니다 (PubMed:7509083). 관련 참고문헌: PMID:7509083
• 이 단백질은 CD3 체인의 인산화된 ITAM 모티프에 결합하는 탠덤 SH2 도메인을 포함하여 자가억제를 완화하고 LCK 매개 Tyr493 인산화를 통한 완전한 활성화를 가능하게 합니다.
• 활성화 시, ZAP70는 주요 어댑터 LAT와 LCP2를 인산화하여 T-세포 증식, 사이토카인 생산 및 세포골격 재구성을 조절하는 하위 캐스케이드를 촉발합니다.
• ZAP70는 흉선세포 발달에 관여하여 양성 선택 전 CD4/CD8 이중 음성 세포의 생존 및 세포주기 진행을 촉진합니다.
• 이는 또한 B-세포 수용체 신호전달을 통해 B-세포 발달 및 활성화에 기여하여 더 넓은 림프구 역할을 강조합니다.
• 세포 내 위치는 주로 세포질에 있으며, TCR 결합 시 플라즈마 막으로 모집됩니다; 또한 CBL 매개 유비퀴틴화를 통한 TCR 내재화에 참여합니다.
• 주로 T-세포, 자연살해세포, 초기 흉선세포 및 pro/pre B-세포에서 발현되며, 유전적 결함은 중증 복합 면역결핍증(SCID) 및 자가면역 질환을 유발합니다.
• 번역 후 변형에는 티로신 인산화, 아세틸화 및 유비퀴틴화가 포함되며, 이는 역동적 조절에 중요합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• Tyr493을 표적하는 포스포-특이적 항체로서, 용해 시료를 포스파타제 억제제로 처리하고 음성 대조군으로 포스파타제 처리법을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우, 예측 분자량은 약 70 kDa입니다; 최적의 분해능을 위해 적절한 겔 농도(예: 8-10%)를 사용하십시오.
• 펩타이드 경쟁 또는 유전자 녹다운/녹아웃 접근법을 사용하여 귀하의 모델 시스템에서 항체 특이성을 검증하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)의 경우, 항원 검색이 필요할 수 있습니다; pH 6 또는 pH 9 검색 완충액을 테스트하십시오.
• 면역형광(IF/ICC)에서, 자극 시 막 위치를 모니터링하십시오; 투과화 및 고정 조건을 최적화해야 합니다.
• ELISA 및 기타 적용 분야에서는 최적 작업 농도를 결정하기 위해 적정이 필요할 수 있습니다.

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