WB, ELISA용 Anti-PLK3 폴리클로날 항체 - Q9H4B4

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: PLK3 기능 및 국소화

• 단백질 정체성 및 패밀리: 세린/트레오닌 단백질 키나제 PLK3(사이토카인 유도성 세린/트레오닌 단백질 키나제, FGF 유도성 키나제, 증식 관련 키나제라고도 함)는 폴로 유사 키나제 패밀리의 일원입니다. 인산화 의존적 결합을 통해 기질 인식을 매개하는 촉매 도메인과 POLO 박스 도메인을 포함합니다.
• 세포 주기 조절: PLK3는 S기 진입과 세포질 분열에 필요합니다. CDC25C 및 BCL2L1을 인산화하여 세포 주기 전이에 영향을 미침으로써 G2 체크포인트와 유사 분열 진행을 조절합니다.
• 스트레스 반응 및 DNA 손상: PLK3는 이온화 방사선, 활성산소(ROS), 고장성 스트레스, 자외선 조사, 저산소증과 같은 스트레스 자극 시 빠르게 활성화됩니다. 세포자멸사를 촉진하기 위해 p53/TP53을 인산화하고, G2/M 체크포인트를 강화하기 위해 CHEK2를 인산화하며, 세포자멸사 유도 기능을 억제하기 위해 p73/TP73을 인산화합니다.
• 주요 인산화 타겟: PLK3 기질에는 ATF2, BCL2L1, CDC25A, CDC25C, CHEK2, HIF1A, JUN, p53/TP53, p73/TP73, PTEN, TOP2A 및 VRK1이 포함됩니다. 이러한 상호작용은 체크포인트 제어, 세포자멸사 및 골지체 역학에서의 역할을 매개합니다.
• 골지체 분해: PLK3는 골지체 소기관에서 VRK1을 인산화하는 MEK1/MAP2K1 의존성 경로를 통해 유사 분열 중 골지체 절편화(fragmentation)에 참여하여 적절한 소기관 분배를 보장합니다.
• 세포 내 국소화: PLK3는 세포질, 핵, 핵소체, 골지체 및 중심체로의 역동적인 국소화를 나타내며, 이는 세포 주기 및 스트레스 신호 전달에서의 다면적인 기능과 일치합니다.
• 조직 및 분화 발현: 전사체는 태반, 폐, 골격근, 심장, 췌장, 난소 및 신장에서 높게 검출되고, 간 및 뇌에서는 약하게 검색됩니다. 조혈 세포에서 PLK3는 최종 분화된 대식세포에서 강력하고 특이적으로 발현됩니다. 원발성 폐 종양에서 발현이 하향 조절됩니다.
• 번역 후 변형 및 키워드: PLK3는 ATP 결합 및 세린/트레오닌 단백질 키나제 활성을 가진 인산화 단백질(단백질체학적 식별)으로 분류됩니다. UniProt 키워드에는 세포자멸사, 세포 주기, DNA 손상, 골지체 및 참조 단백질체가 포함됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 두 번째 POLO 박스 도메인의 일부를 포함하는 아미노산 487–646(C-말단 영역)에 걸쳐 있습니다. 이 영역은 PLK 패밀리 내에서 특이성을 제공할 수 있습니다. 필요한 경우 PLK1 또는 PLK2와의 교차 반응성은 실험적으로 확인해야 합니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우 예상 분자량은 약 72 kDa입니다. 의도한 종(사람, 마우스, 랫트) 및 샘플 유형에서 검출을 확인하십시오. 적절한 로딩 컨트롤을 사용하고 밴드 정체성을 확인하기 위해 siRNA 매개 녹다운(knockdown) 또는 녹아웃(knockout) 용해물을 고려하십시오.
• ELISA 애플리케이션은 코팅 조건과 항체 희석 배율을 테스트하여 최적화할 수 있습니다. 이 항체는 토끼 폴리클로날로 제공되며 표준 간접 ELISA 프로토콜에 적합합니다.
• 스트레스 유도성 경로를 연구하기 위해 DNA 손상 제제(예: 에토포사이드, UV), ROS 유도제(예: H₂O₂) 또는 저산소 모방제(예: CoCl₂)로 세포를 처리하고 WB를 통해 PLK3 활성화 또는 발현 변화를 확인하십시오.
• 면역형광법 또는 면역조직화학의 경우, 사용자는 검출된 세포 내 구획(세포질, 핵, 골지체)과 호환되는 고정 및 투과화 조건을 설정해야 합니다. 일부 세포 유형에서 내인성 PLK3 수준은 낮을 수 있으므로 농축 또는 신호 증폭이 필요할 수 있습니다.

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