WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-PMEL 폴리클론항체 - P40967

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PMEL 기능 및 위치

• PMEL(gp100, Pmel17, SILV, ME20으로도 알려짐)은 멜라노솜 생합성에서 중심 역할을 하는 멜라노사이트 특이적 제1형 막관통 당단백질입니다. 이는 멜라노솜 내 생리적 아밀로이드 섬유의 전구체입니다.
• 이 단백질은 엄격하게 조절되는 단백질 분해 과정을 겪습니다; 그의 아밀로이드 생성성 단편들은 평행한 섬유상 시트로 조립되어 제1단계 전구멜라노솜이 줄무늬가 있는 타원형 제2단계 멜라노솜으로 신장되는 것을 유도합니다.
• 성숙한 색소 침착된 제3 및 제4단계 멜라노솜에서, 아밀로이드 기질은 유멜라닌 중합을 위한 지지체 역할을 하여 전구체를 농축하고 잠재적으로 독성 중간체를 격리할 수 있습니다.
• 세포내 위치는 여러 구획에 걸쳐 있습니다: 소포체 막, 골지체, cis-골지 네트워크 막, 엔도솜(다포체), 멜라노솜 및 분비된 세포외 소포체에서 발견됩니다.
• PMEL은 흑색종 특이적 종양 항원으로 인식됩니다. 그의 비돌연변이 자체 펩타이드 중, G9-154 (KTWGQYWQV), G9-209 (ITDQVPFSV), G9-280 (YLEPGPVTA)와 같은 HLA-A2 제한적 에피토프는 면역우세성을 가지며 세포독성 T-세포 반응을 자극할 수 있습니다.
• 정상적으로 휴지기 성인 멜라노사이트에서 낮은 수준으로 발현되지만, 증식하는 신생아 멜라노사이트 및 종양 성장 중, 특히 악성 흑색종에서 강하게 과발현됩니다. 이형성 모반에서도 일부 발현이 발견됩니다.
• 번역 후 변형에는 광범위한 당화(시아일산 함유 탄수화물), 이황화 결합 형성, 염기성 잔기 쌍에서의 절단이 포함됩니다. 성숙한 단백질은 신호 펩타이드, 막관통 나선, 및 내강/세포외 반복 서열을 포함합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 PMEL의 세포외 도메인 내 아미노산 320–430에 해당하며, 이 영역은 노출되어 있을 가능성이 높고 전체 길이 및 처리된 단편 모두의 인식에 적합합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 예상되는 전체 길이 밴드를 약 70 kDa에서 확인하십시오; 멜라노사이트 세포 추출물에서 절단된 아밀로이드 생성성 단편(예: Mα, Mβ)을 나타내는 추가적인 낮은 분자량 밴드가 관찰될 수 있습니다.
• 면역형광/ICC에서, 멜라노솜 위치는 흑색종 세포주(예: SK-MEL-28, Mel-624) 또는 일차 멜라노사이트를 사용하여 검증할 수 있으며; 멜라노솜 마커와의 공동 염색이 권장됩니다.
• ELISA 응용 분야는 재조합 PMEL 또는 세포 용해물을 사용하여 최적화해야 합니다; 폴리클론 특성으로 인해, 이 항체는 높은 민감도를 제공할 수 있지만 신중한 농도 조정이 필요합니다.
• 마우스 및 래트 PMEL과의 교차 반응성이 선언되었습니다; 그러나 대규모 연구 전에 특정 종 및 조직 환경에서의 반응성을 확인하는 것을 권장합니다.

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