Anti-POLR2A Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, IP, ELISA - P24928

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: POLR2A 기능 및 국재화

• POLR2A는 진핵 세포에서 mRNA 전구체와 많은 비코딩 RNA를 합성하는 효소인 DNA 지향성 RNA 폴리머라제 II의 가장 큰 소단위체(RPB1)를 암호화합니다.
• RPB1은 두 번째로 큰 소단위체인 RPB2와 함께 Pol II의 촉매 코어를 형성합니다. RNA 중합 동안 뉴클레오타이드 첨가에 필수적인 Mg²⁺ 이온을 조율하는 보존된 DxDGD 모티프를 포함합니다. 관련 참고문헌: PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112
• 효소는 전사 개시, 신장 및 종료 과정을 순환합니다. 개시 단계에서 Pol II는 TATA 박스나 CpG 섬과 같은 요소를 포함하는 프로모터에 모집됩니다. 관련 참고문헌: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474
• RPB1은 52개의 헵타펩타이드 반복으로 구성된 독특한 C-말단 도메인(CTD)을 가지고 있습니다. CTD는 전사 단계를 조율하고 가공 인자를 모집하기 위해 동적 인산화(특히 Ser-2 및 Ser-5)를 겪습니다. 관련 참고문헌: PMID:24207025, PMID:26124092
• DNA 의존성 RNA 폴리머라제 활성 외에도 POLR2A는 RNA 의존성 RNA 폴리머라제로 작용하여 비코딩 RNA를 확장하고 B형 간염 델타 바이러스의 복제를 매개할 수 있습니다.
• 이 단백질은 주로 핵에 국재하지만, 세포질에서도 발견되며 유사 분열 동안 염색체와 결합합니다.
• POLR2A의 돌연변는 지적 장애(NEDHIB)를 포함한 신경발달 장애와 관련이 있으며, 이는 유전자 발현에서의 필수적인 역할을 강조합니다.
• 대안적 스플라이싱 및 번역 후 변형(아세틸화, 메틸화, 유비퀴틴화, 인산화)은 POLR2A의 기능과 조절을 더욱 다양화합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 POLR2A의 N-말단 영역(aa 1-260)에 해당하며, 이는 반복적인 CTD 외부에 위치합니다. 이 설계는 다른 일부 단백질에서 발견되는 고도로 상동성인 CTD보다 RPB1 코어에 대한 특이성을 부여할 수 있습니다.
• 이 항체는 WB, IF/ICC, IP 및 ELISA에서 작동하는 것이 입증되었습니다. WB를 수행할 때 예상 분자량이 약 217 kDa임을 참고하십시오. 이러한 대형 단백질의 경우 낮은 백분율의 SDS-PAGE 젤을 사용하고 철저한 전송 최적화를 고려하십시오.
• 마우스 및 쥐와의 교차 반응성이 보고되어 있어, 이러한 종 간에 에피토프가 보존되어 있음을 시사합니다. 확인을 위해 특정 모델 시스템에서 검증하십시오.
• IF/ICC의 경우 POLR2A 국재화에 기초하여 핵 및 핵주위 염색이 예상되지만, 고정 및 투과화 조건에 따라 배경이 달라질 수 있습니다.
• IP 실험에서는 Pol II 복합체를 효과적으로 용해하기 위해 용해 완충액이 핵 단백질 추출과 호환되는지 확인하십시오.

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