WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용 항PSAP (프로사포신) 토끼 다클론 항체 - P07602

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PSAP (프로사포신)의 기능과 위치

• 프로사포신(PSAP)은 524개 아미노산으로 구성된 전구체 당단백질로, 리소좀에서 단백질 분해 과정을 거쳐 4개의 상동 사포신 펩타이드(사포신 A, B, C, D)를 생성합니다. 이 펩타이드들은 스핑고지질 가수분해효소에 필수적인 비효소적 활성화 단백질로 작용합니다.
• 사포신은 막 이중층에서 지질 기질을 추출하여 상응하는 효소에 전달함으로써 당스핑고지질의 분해를 촉진합니다. 사포신 B는 아릴설파타아제 A, 베타-갈락토시다아제, 알파-갈락토시다아제 A를 활성화하며, 사포신 C는 글루코세레브로시다아제를, 사포신 D는 산 세라미다아제를 활성화합니다.
• 리소좀 보조인자 역할 외에도 전장 프로사포신은 G 단백질 결합 수용체 GPR37과 GPR37L1을 통한 신호 전달을 통해 신경영양 및 미엘린영양 기능을 발휘하여 신경 생존과 미엘린 생성을 촉진합니다.
• PSAP는 널리 발현되며 뇌, 신장, 간에서 높은 수준으로 발현되고 주로 리소좀 내강에 위치합니다. 또한 분비되어 뇌척수액과 우유를 포함한 세포외액에서 검출됩니다.
• PSAP 돌연변이는 고셔병, 이황성 백질이영양증, 크라베병을 비롯한 다양한 리소좀 축적병, 그리고 복합 사포신 결핍이 동반된 복합형과 관련이 있습니다. 다형성은 파킨슨병 위험과도 연관되어 있습니다.
• 이 단백질은 안정성, 프로세싱 및 기능적 활성화에 중요한 여러 사슬 내 이황화 결합과 N-연결 당화 부위를 포함합니다. 표준 프로사포신 전구체의 계산된 분자량은 58.1 kDa이며, 광범위한 당화로 인해 SDS-PAGE에서 종종 65–70 kDa 위치에 밴드가 나타납니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 PSAP의 275–524 잔기에 해당하며 사포신 C, D 도메인과 C-말단 링커를 포함합니다. 따라서 생성된 다클론 항체는 전장 전구체와 처리된 사포신 C/D 단편을 모두 검출할 것으로 예상됩니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 환원 조건 하 표준 SDS-PAGE를 권장합니다. 인간, 마우스, 쥐 조직 용해물에서 일반적으로 약 58 kDa 위치에 우성 밴드가 관찰되며 이는 프로사포신 전구체에 해당합니다. 단백질 분해 처리로 인해 추가적인 낮은 분자량 밴드가 나타날 수 있습니다.
• 면역형광법을 수행할 때는 리소좀 내 항원에 접근하기 위해 투과화가 필요합니다. 공동국소화 연구를 위해 리소좀 마커(예: LAMP1)로 공동염색하는 것을 권장합니다.
• 파라핀 포매 절편의 면역조직화학의 경우 구연산 완충액(pH 6.0)을 이용한 항원 회수가 종종 신호를 향상시킵니다. 양성 대조군 조직은 뇌(소뇌, 해마)와 신장이 포함됩니다.
• 이 항체는 적합한 항PSAP 단클론 항체와 짝을 이루었을 때 포획 또는 검출 시약으로 ELISA에 사용할 수 있습니다. 최적 희석비와 분석 조건은 실험적으로 결정해야 합니다.

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