WB, IHC-P, ELISA용 항-RNF8 토끼 단일클론 항체 - O76064

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: RNF8 기능 및 위치

• E3 유비퀴틴 단백질 리가아제 RNF8(RING 핑거 단백질 8)는 DNA 손상 반응의 핵심 매개체로, ATM에 의해 인산화된 MDC1에 의해 이중가닥 절단 부위로 모집됩니다. 이 부위에서 히스톤 H2A 및 H2AX의 'Lys-63' 연결 유비퀴틴화를 촉매하여 BRCA1 및 TP53BP1과 같은 DNA 복구 단백질이 전리방사선 유도 초점으로 조립되는 것을 촉진합니다.
  관련 참고문헌: PMID:18001824, PMID:18006705
• RNF8는 H2A/H2AX 유비퀴틴화를 매개하여 판코니 빈혈 복합체 및 FAAP20와 같은 인자를 DNA 가닥간 교차결합 부위로 모집하는 것을 촉진하며, 또한 DSB 부근에서 ATM 의존적 전사 침묵을 조정하여 전사-복구 충돌을 방지합니다.
• 뚜렷한 E2 효소 상호작용을 통해 RNF8는 'Lys-48' 연결 폴리유비퀴틴 사슬을 형성할 수 있습니다(예: UBE2L6와 함께). 이는 CHEK2, JMJD2A/KDM4A 및 KU80/XRCC5와 같은 기질의 프로테아좀 분해를 유도하여 복구 경로 선택과 크로마틱 접근성을 조절합니다.
  관련 참고문헌: PMID:11322894, PMID:14981089, PMID:17724460
• 고차 크로마틴 탈응집에 기여하며, H4K16 아세틸화를 유발하는 히스톤 H2B 유비퀴틴화를 촉진하여 ATM 키나아제를 간접적으로 활성화합니다.
• RNF8는 정자형성에 필수적이며, 정자 성숙 중 히스톤 치환을 유도하고, DSB 복구에서의 역할을 통해 면역계의 클래스 전환 재조합에 참여합니다.
  관련 참고문헌: PMID:22865450
• 이 단백질은 주로 핵에 위치하며 세포질, 중간체 및 텔로미어에도 추가로 존재하는데, 이는 세포주기 진행 및 게놈 안정성에서의 다면적 역할과 일치합니다.
• 조직 발현은 전신적으로 나타나며, 태아 발달 중에는 뇌, 흉선 및 간에서, 성인에서는 뇌 및 고환에서 가장 높은 수준으로 발현되는데, 이는 DNA 복구 및 크로마틴 조절에서의 광범위한 중요성을 강조합니다.
• RNF8 단백질은 RING 핑거 도메인을 포함하며 인단백질로 분류되며, 분자량은 ~55.5 kDa입니다(UniProt: 55518 Da). 키워드는 또한 숙주-바이러스 상호작용, 금속 결합(아연) 및 유비퀴틴 결합에 대한 관여를 강조합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 RNF8의 N-말단 1~260 아미노산에 해당하므로, 본 항체는 인산 의존적 상호작용에 관여하는 FHA 도메인을 포함하여 N-말단 영역 내 에피토프를 인식할 수 있습니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인간, 마우스 및 래트 세포 용해물에서 RNF8는 약 56 kDa의 겉보기 분자량으로 이동할 것으로 예상됩니다; 특이성을 확인하기 위해 적절한 양성 및 음성 대조군을 실행하십시오.
• IHC-P의 경우, 항원 회수(예: 시트르산 완충액, pH 6.0)를 최적화하고 고환이나 뇌와 같이 알려진 RNF8 발현 조직에서 유효성을 검증하십시오.
• ELISA의 경우, 최종 사용자는 재조합 항원 또는 관련 샘플 유형을 사용하여 최적의 코팅 농도와 검출 조건을 결정해야 합니다.
• 마우스 및 래트 RNF8와의 교차 반응성이 보고되었습니다; 일상 사용 전에 관련 모델 시스템에서 성능을 확인하십시오.

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