WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA용 Anti-Rpb1 CTD 토끼 단일클론 항체 - P24928

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Rpb1 CTD 기능 및 국소화

• POLR2A는 DNA 지향성 RNA 중합효소 II (Pol II)의 가장 큰 촉매적 소단위인 Rpb1을 인코딩하며, mRNA 전구체 및 비코딩 RNA 합성을 담당합니다. 이 효소는 DNA를 주형으로 하고 리보뉴클레오사이드 삼인산을 사용하여 RNA를 중합하며, 개시, 신장 및 종료 단계를 거쳐 진행됩니다. (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474, PubMed:8381534, PubMed:9852112) 관련 참고문헌: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474, PMID:8381534, PMID:9852112
• Rpb1의 CTD는 52개의 탠덤 헵타펩타이드 반복을 포함하며, 전사 조절 인자의 스캐폴드 역할을 합니다. Ser5 (Ser5P)의 인산화는 프로모터 탈출을 촉진하고, Ser2 인산화 (Ser2P)는 일시 정지 해제 및 신장에 필요합니다. 또한 CTD 리신 아세틸화는 즉시 초기 유전자 유도를 조절하고, 메틸화/디메틸화는 일반적으로 표적 유전자 발현을 억제합니다. (PubMed:24207025, PubMed:26124092) 관련 참고문헌: PMID:24207025, PMID:26124092
• Rpb1은 신생 RNA를 교정하여 잘못 도입된 뉴클레오타이드의 역추적 및 절단을 가능하게 하는 3'→5' 엑소뉴클레아제 활성을 가집니다. (PubMed:8381534) 관련 참고문헌: PMID:8381534
• DNA 의존적 역할 외에도 Rpb1은 RNA 의존적 RNA 중합효소 활성을 나타내며, 내부 주형을 사용하여 비코딩 RNA를 연장할 수 있고, 바이러스성 소형 델타 항원과 결합할 때 B형 간염 델타 바이러스 게놈을 복제할 수 있습니다.
• Rpb1은 주로 전사가 일어나는 핵에 국소화하지만, 세포질과 염색체에서도 검출되었으며, 이는 전사 및 잠재적인 핵외 기능과 일치합니다.
• Rpb1의 번역 후 변형에는 인산화, 아세틸화, 메틸화, 유비퀴틴화 및 sumoylation이 포함되며, 이는 활성과 상호작용을 동적으로 조절합니다.
• POLR2A의 대안 스플라이싱은 여러 이소폼을 생성하지만, 기능적 차이는 완전히 규명되지 않았습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 CTD 내 아미노산 1611-1710에 해당하므로, 이 항체는 전체 Rpb1 또는 특정 CTD 에피토프를 검출함을 시사합니다. 포스파타제 처리 샘플을 사용하여 인산 의존적 반응성을 확인하십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우, 전장 Rpb1 단백질은 ~217 kDa로 예측됩니다. 추가 밴드(예: ~64 kDa)는 이소폼 또는 분해 산물일 수 있으므로 적절한 대조군으로 검증하십시오.
• 이 항체는 ChIP 분석에 적용되었습니다. 특정 표적 좌위에 대해 가교 및 크로마틴 절단 조건을 최적화하십시오.
• 면역형광의 경우 핵 염색을 예상하며, 국소화를 확인하기 위해 세포질 마커와 이중 염색을 수행하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 파트너

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