Anti-RSK2 / RPS6KA3 Rabbit Monoclonal Antibody for WB, IHC-P, ELISA - P51812

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: RSK2 기능 및 국소화

• RSK2 (리보솜 단백질 S6 키나제 알파-3, Ribosomal protein S6 kinase alpha-3)는 RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B, ISPK-1로도 알려져 있으며, 사람 염색체 X에 있는 RPS6KA3 유전자에 의해 암호화되는 세린/트레오닌 단백질 키나제입니다. 이는 AGC 키나제 패밀리에 속하며 링커 영역으로 연결된 두 개의 키나제 도메인을 포함합니다.
• ERK/MAPK 신호 전달 캐스케이드의 하류에서 작용하는 RSK2는 EGF 자극 시 전사 인자 CREB1 및 히스톤 H3의 Ser-10을 직접 인산화하여 즉시 초기 유전자 발현을 유도합니다 (PubMed:10436156, 9770464).
  관련 참고문헌: PMID:10436156 PMID:9770464
• RSK2는 세포 사멸 유도 인자인 BAD 및 DAPK1을 인산화하여 불활성화함으로써 세포 생존을 촉진하고, 이들의 세포 사멸 기능을 억제합니다 (PubMed:16213824).
  관련 참고문헌: PMID:16213824
• 리보솜 단백질 S6 (RPS6) 및 번역 개시 인자 EIF4B의 인산화를 통해, RSK2는 인슐린 및 유사 분열원(mitogen)에 대한 반응으로 캡 의존적 번역을 향상시킵니다 (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  관련 참고문헌: PMID:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• RSK2는 mTORC1의 핵심 조절 인자인 TSC2 및 RPTOR를 인산화하여 영양 및 성장 신호를 통합하며, 이를 통해 PI3K/AKT 경로와 독립적으로 mTOR 신호를 조절합니다 (PubMed:18722121).
  관련 참고문헌: PMID:18722121
• RSK2는 핵과 세포질 모두에 국소화하며 많은 조직에서 발현되며, 골격근에서 가장 높은 수준이 발견됩니다.
• RPS6KA3의 돌연변은 코핀-로리 증후군(CLS)과 관련이 있으며, 이는 정신운동 지체 및 골격 이상을 특징으로 하는 X-연관 지적 장애입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 RSK2의 아미노산 600-700에 상응하는 합성 펩타이드로, 사람, 쥐, 랫트 간에 보존된 영역이므로 관찰된 교차 반응성을 뒷받침합니다. 웨스턴 블랏의 경우 약 84 kDa에서 밴드가 예상됩니다. 환원된 샘플을 사용하고 세포 용해물 20-30 µg을 로딩하는 것을 고려하십시오. 적절한 양성 대조군(예: HeLa, A431 또는 NIH/3T3 세포) 및 음성 대조군(예: RSK2 녹아웃 용해물 또는 siRNA 처리 샘플)을 사용하여 밴드 특이성을 검증하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)의 경우 시트르산 버퍼(pH 6.0)를 사용한 열 매개 항원 회수가 권장됩니다. 1차 항체를 1:50-1:200 희석비부터 적정하고 폴리머 기반 HRP 시스템으로 검출을 최적화하십시오. 항상 아이소타입 대조군과 RSK2를 발현하는 것으로 알려진 조직 섹션을 포함하십시오.
• ELISA 응용의 경우 재조합 RSK2 단백질 또는 펩타이드로 코팅하고 표준 간접 ELISA 프로토콜을 사용하십시오. 최적의 항체 작업 농도는 체커보드 적정(checkerboard titration)을 통해 경험적으로 결정해야 합니다.

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