WB, IF/ICC, ELISA용 항-SARS-CoV-2 3CLpro 단클론 항체 - P0DTC2

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 스파이크 당단백질의 기능과 위치

• 스파이크 당단백질(S)은 숙주 수용체인 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)에 결합하여 바이러스 침입을 매개하는 삼량체 클래스 I 융합 단백질입니다 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). 관련 참고문헌: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• 수용체 결합 후 S 단백질은 TMPRSS2 또는 카텝신 L과 같은 숙주 프로테아제에 의해 S2' 부위에서 단백질 분해 절단되어, 막 융합을 유도하는 비가역적 구조 변화가 일어납니다 (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). 관련 참고문헌: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• 스파이크 단백질은 뉴로필린-1(NRP1) 및 뉴로필린-2(NRP2)를 포함한 대체 수용체를 이용한 침입이 가능하며, 이는 ACE2 발현이 낮은 후각 상피 세포 감염에 기여할 수 있습니다 (PubMed:33082294, PubMed:33082293). 관련 참고문헌: PMID:33082294 PMID:33082293
• 또한, 아시알로글리코단백질 수용체 1(ASGR1)은 ACE2 비의존적 방식으로 대체 수용체로 작용할 수 있습니다 (PubMed:34837059). 관련 참고문헌: PMID:34837059
• S 단백질은 바이러스 입자 막에 위치하며, 감염 중 숙주의 소포체-골지 중간 구획(ERGIC)과 숙주 세포막에서도 발견됩니다.
• 막 융합에 중요한 6-나선 다발 구조를 형성하는 두 개의 헵타드 반복 영역(HR1 및 HR2)을 포함하며, 단백질은 여러 이황화 결합과 팔미토일화 부위로 고도로 당화되어 있습니다.
• 스파이크 단백질은 수퍼항원으로 작용하여 테더린 길항 작용을 포함한 숙주 선천성 면역 반응을 억제하여 면역 회피에 기여합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯(WB)의 경우 ~34 kDa(3CLpro 단량체)에서 밴드가 관찰될 수 있습니다; 바이러스 프로테아제의 분해를 방지하기 위해 시료 준비 시 프로테아제 저해제를 사용하는 것을 권장합니다.
• 면역형광(IF/ICC)에서 SARS-CoV-2 감염 세포의 세포질 3CLpro 검출을 위해 적절한 고정과 투과화를 진행하세요; 적합한 양성 대조군 세포주에서 검증을 수행하세요.
• ELISA 적용 시 항체와 재조합 3CLpro 항원의 적정 농도 측정이 필요할 수 있습니다; 높은 감도를 위해 샌드위치 ELISA 형식을 고려하세요.
• 서열 보존성으로 인해 다른 코로나바이러스의 3CLpro와의 교차 반응성을 배제할 수 없습니다; 관련 시료 시스템에서 특이성을 확인하세요.

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