WB, IP, ELISA용 항SARS-CoV-2 스파이크 S2 다클론 항체 - P0DTC2

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 스파이크 당단백질(S2 서브유닛) 기능과 세포 내 위치

• 스파이크 당단백질(S)은 클래스 I 바이러스 융합 단백질이며 SARS-CoV-2의 주요 표면 항원입니다. S1 서브유닛의 수용체 결합 도메인(RBD)이 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2) 수용체에 결합하여 숙주 세포에 대한 초기 부착을 매개합니다. 관련 참고문헌: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• 수용체 결합 후 S 단백질은 막관통 프로테아제 세린 2(TMPRSS2) 또는 카텝신 L과 같은 숙주 프로테아제에 의해 S2' 부위에서 단백질 분해 절단되어 S2 서브유닛의 입체구조 재배열이 유발되고, 이를 통해 바이러스 외피와 숙주 세포막의 융합이 진행됩니다. 관련 참고문헌: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• 바이러스는 후각 상피 세포에 고발현되어 후각 상실 증상의 원인으로 추정되는 뉴로필린-1(NRP1) 및 뉴로필린-2(NRP2), 인테그린, 그리고 아시알로당단백질 수용체 1(ASGR1) 등 대체 진입 수용체를 ACE2 비의존적 방식으로 이용할 수도 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• 세포 내 위치: S 단백질은 바이러스 입자 막에 존재하며 숙주의 소포체-골지 중간 구획(ERGIC) 막을 통해 이동합니다. 융합은 숙주 세포막 또는 엔도좀 내에서 발생합니다.
• 번역 후 변형으로는 광범위한 N-연결 당화, 이황화 결합, 팔미토일화, 그리고 S1과 S2 서브유닛으로의 절단이 있습니다. UniProt 키워드: 바이러스 외피 단백질, 막관통, 당단백질, 숙주-바이러스 상호작용, 바이러스 면역회피, 초항원, 숙주 선천성 면역 억제.
• S 단백질의 줄기 도메인은 3개의 유연한 힌지를 가지고 있어 수용체 결합 헤드의 상당한 배향 자유도를 허용하며, 이는 면역회피와 수용체 결합에 중요한 특징입니다. 관련 참고문헌: PMID:32817270

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 S2 서브유닛의 1174–1273번 아미노산에 걸치는 합성 펩타이드입니다(참조 서열 YP_009724390.1 기준). 이 항체는 전장 스파이크 단백질(~141 kDa)과 S2 절단 단편 모두를 인식할 것으로 예상됩니다.
• 웨스턴 블롯팅의 경우 환원성 SDS-PAGE 조건을 사용하세요. 약 141 kDa 위치에서 전장 스파이크에 해당하는 밴드가 관찰되어야 하며, S2 절단 산물을 나타내는 저분자량 밴드도 나타날 수 있습니다. 비환원 조건에서는 고차 올리고머(삼량체)를 검출할 수 있습니다.
• SARS-CoV-2 감염 세포의 용해물이나 재조합 스파이크 단백질과 같은 적절한 양성 대조군을 사용하세요. GAPDH, β-액틴 등의 로딩 대조군 사용을 권장합니다.
• 면역침전의 경우 중쇄 밴드의 검출을 최소화하기 위해 항체가 미리 결합된 단백질 A/G 비드를 사용하는 것을 고려하세요.
• ELISA에서 이 다클론 항체는 스파이크 단백질 정량을 위한 샌드위치 분석에서 포획 또는 검출 시약으로 사용될 수 있습니다. 사용하시는 특정 플레이트 포맷에 맞게 코팅 농도와 차단 완충액을 최적화하세요.

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