WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용 Anti-SIGLEC3/CD33 토끼 다클론 항체 - P20138

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: SIGLEC3/CD33의 기능 및 위치

• CD33(Siglec-3, p67, gp67)은 단일 통과형 I형 막 단백질이자 시알산 결합 면역글로불린 유사 렉틴(Siglec) 계열의 구성원으로, N말단 V-set Ig 유사 도메인과 2개의 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프(ITIM)를 포함하는 세포질 꼬리로 특징지어집니다.
• 이는 억제성 수용체로 기능합니다. 시알산 리간드 또는 C1q가 결합하면 LCK와 같은 Src 유사 키나아제에 의해 ITIM이 인산화되고, 그 결과 티로신 포스파테이스 PTPN6/SHP-1 및 PTPN11/SHP-2가 모집되어 면역 신호를 하향 조절합니다(PubMed:10887109, 10556798, 10206955). 관련 참고문헌: PMID:10887109, PMID:10556798, PMID:10206955
• 알파-2,3 및 알파-2,6 결합 시알산에 우선적으로 결합하며, 알파-2,6 결합 글리칸에 대해 더 높은 결합력을 보입니다(PubMed:7718872). 관련 참고문헌: PMID:7718872
• 단핵구 활성화에 대한 CD33의 억제 효과에는 포스포이노시타이드 3-키나아제(PI3K) 신호가 관여합니다(PubMed:15597323). 관련 참고문헌: PMID:15597323
• 세포 내에서 CD33은 원형질막과 퍼옥시좀에 위치합니다.
• 단핵구, 대식세포 및 과립구를 포함한 단핵구/골수계 계통의 세포에 특이적으로 발현되며, 중추신경계에서는 주로 미세아교세포에서 발견됩니다.
• 주요 키워드는 세포 부착, 면역 조절 및 대체 스플라이싱에서의 역할을 강조하며, 당단백질 및 인산화 단백질 변형이 보고되어 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 시알산 결합 V-set Ig 도메인을 포함하는 인간 CD33의 아미노산 49-259(세포외 도메인)에 해당합니다. 이 설계는 천연 입체구조를 표적으로 하므로 유세포분석과 유사한 적용 분야(IF/ICC) 및 면역조직화학(IHC-P)에서 세포 표면에 발현된 CD33을 검출하는 데 적합합니다.
• 웨스턴 블롯(WB)에서 예상 단백질 분자량은 약 40 kDa이지만, 당화로 인해 관찰되는 밴드가 더 높은 분자량에서 나타날 수 있습니다. 환원 조건의 겔을 사용하고 적절한 양성 대조군(예: HL-60 또는 THP-1과 같은 골수계 세포주)으로 검증하는 것이 좋습니다.
• 이 다클론 항체를 면역침전 또는 ELISA에 사용할 때는 다클론 항체의 특성상 감도가 향상될 수 있지만 배경 신호도 증가할 수 있음을 고려해야 합니다. 블로킹 및 세척 조건을 최적화하는 것이 권장됩니다.
• 마우스 및 랫드와의 교차 반응성은 보존된 에피토프를 의미하지만, 구체적인 실험 조건에 따라 서열 정렬을 확인해야 하며 해당 종에서의 검증이 필수적입니다.
• IHC-P의 경우 에피토프 접근성이 달라질 수 있으므로 항원 회복 방법(예: pH 6.0 구연산 완충액)과 조직 고정 조건을 최적화해야 합니다.
• 이 항체는 적합한 짝 항체와 함께 사용할 경우 샌드위치 ELISA의 포획 또는 검출 구성 요소로 적합합니다. 사용자는 특정 완충액 시스템에서의 성능을 확인해야 합니다.

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