WB, IHC-P, IP, ELISA용 Anti-STIM1 Rabbit PolymAb® - Q13586

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: STIM1 기능 및 국소화

• STIM1은 세포막의 두 가지 주요 내향 정류 Ca²⁺ 채널인 Ca²⁺ 방출 활성화 Ca²⁺ (CRAC) 채널과 아라키돈산 조절 Ca²⁺ 선택성 (ARC) 채널을 개폐하는 Ca²⁺ 센서로 작용하며, 칼슘 항상성 유지에 중심적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:15866891 PMID:16005298 PMID:16208375

• 소포체(ER) Ca²⁺ 저장고가 고갈되면 STIM1은 올리고머화되어 소포체막에서 소포체-세포막 접합부로 이동하여, ORC1, ORAI2 및 ORAI3 CRAC 채널 서브유닛을 직접 활성화하여 지속적이고 진동하는 Ca²⁺ 유입을 생성합니다. 관련 참고문헌: PMID:16537481 PMID:32415068

• STIM1은 법랑질 형성에 관여하며, 이는 조직 특이적 석회화 과정에서의 역할을 강조합니다. 관련 참고문헌: PMID:24621671

• 이 단백질은 신호 전달 어댑터인 STING을 소포체에 유지함으로써 활성화 및 하위 면역 신호 전달을 방지하여 1형 인터페론 반응을 음성 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:30643259

• STIM1은 다양한 인간 1차 세포 및 종양 세포주에 보편적으로 발현되어 세포 생리학에서의 기본적인 역할을 시사합니다.

• 세포 내적으로 STIM1은 세포막, 소포체막, 세포질, 세포골격 및 근소포체에 국재화하며, 이는 역동적인 셔틀링 기능과 일치합니다.

• 번역 후 수정에는 N-연결 글리코실화 및 인산화가 포함되며, 이는 안정성과 활성을 조절할 수 있습니다. 이 단백질은 신호 펩타이드, 단일 트랜스맴버 나선, 세포질 코일드-코일 도메인을 포함합니다.

• 대안 스플라이싱은 여러 이소형을 생성하며, 이는 조직 특이적 발현 또는 뚜렷한 기능적 특성을 나타낼 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 아미노산 530~685에 걸쳐 있으며, 이는 STIM1의 세포질 C-말단 세그먼트 내 영역입니다. 이 설계는 전장 단백질 및 특정 스플라이스 변이체의 검출에 유리할 수 있지만, 이 영역이 없는 이소형을 놓칠 수 있습니다. 대상 세포주 또는 조직에서 검증하십시오.

• 웨스턴 블로팅의 경우 글리코실화나 대안 스플라이싱으로 인해 추가 밴드가 나타날 수 있지만 77 kDa 부근의 주요 밴드가 예상됩니다. 적절한 로딩 컨트롤을 사용하고 음성 대조군(예: siRNA 녹다운 또는 가능한 경우 CRISPR 녹아웃)으로 특이성을 확인하십시오.

• 면역조직화학(IHC-P)의 경우 STIM1의 세포 내 국소화로 인해 투과화가 필요할 수 있으므로 항원 회수 방법과 항체 희석 비율을 최적화해야 합니다. 적절한 이소타입 대조군을 포함하고 알려진 양성 및 음성 조직으로 염색을 검증하십시오.

• 면역침전(IP)의 경우 효율적인 포획을 위해 항체를 단백질 A/G 비드와 미리 배양하고, 하위 WB에서 중/경쇄 간섭을 방지하기 위해 가교 결합을 고려하십시오. ORAI1과 같은 알려진 상호작용 파트너의 공동 침전을 확인하십시오.

• ELISA의 경우 최적의 코팅 및 검출 조건을 결정하기 위해 면역원 또는 세포 용해물에 대해 항체를 적정(titrate)하십시오. 샌드위치 ELISA 설정에 일치하는 검출 항체 또는 접합된 2차 항체와 함께 사용하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브리지

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