WB, IF-P, IHC-P, ELISA용 Anti-UBA1/7 Rabbit PolymAb® - P22314 / P41226

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: UBA1/7 기능 및 국소화

• UBA1 (ubiquitin-like modifier-activating enzyme 1)은 단백질을 프로테아좀 분해(proteasomal degradation)로 표적하여 유비퀴틴 접합을 시작하는 주요 E1 효소입니다 (PubMed:1447181, PubMed:1606621, PubMed:33108101). 관련 참고문헌: PMID:1447181 PMID:1606621 PMID:33108101
• 이 효소는 C-말단 글리신의 ATP 의존성 아데닐화를 통해 유비퀴틴을 활성화하며, 후속 E2/E3 전달에 필수적인 유비퀴틴-E1 티오에스터 중간체를 형성합니다 (PubMed:1447181). 관련 참고문헌: PMID:1447181
• UBA1은 방사선 유발성 초점(foci) 형성을 촉진하고 TP53BP1 및 BRCA1와 같은 복구 단백질을 손상 부위로 모집하여 DNA 손상 반응에서 중요한 역할을 합니다 (PubMed:22456334). 관련 참고문헌: PMID:22456334
• 이 단백질은 세포질, 핵, 미토콘드리아를 포함한 여러 세포 내 소기관에 국소화되며, 이는 다양한 기능적 역할과 일치합니다.
• UBA1는 조직에 널리 발현하며, 단백질 수준에서 적혈구에서의 검출이 확인되었습니다.
• UBA1의 번역 후 변형(post-translational modifications)에는 아세틸화 및 인산화가 포함되며, 유전자의 돌연변이는 신경 퇴행성 장애 및 VEXAS 증후군과 관련이 있습니다.
• UBA7 단백질 (ubiquitin-like modifier-activating enzyme 7)은 ISG15에 대한 독특한 특이성을 가진 관련 E1 효소이지만, UBA1과 구조적 상동성을 공유하여 이 항체에 의한 교차 인식이 가능합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원 펩타이드 (UBA1의 aa959-1058)는 UBA7과 상당한 상동성을 공유하는 영역 내에 위치하므로, 이중 타겟 특이성을 설명합니다. 샘플에서 녹다운(knockdown) 또는 녹아웃(knockout) 대조군을 사용하여 특이성을 검증하십시오.
• 웨스턴 블로팅(WB)에서 UBA1은 ~118 kDa, UBA7은 ~112 kDa에서 주요 밴드가 예상되며, 번역 후 변형 또는 스플라이스 이소폼에 따라 차이가 있을 수 있습니다.
• 면역형광법(IF) 및 면역조직화학(IHC)의 경우, UBA1은 세포질, 핵, 미토콘드리아에 분포되어 있으므로, 이 소기관의 신호를 보존하기 위해 고정 및 투과화 조건을 최적화하십시오.
• ELISA 애플리케이션의 경우, 표준으로 재조합 UBA1 단백질 또는 타겟이 첨가된 세포 용해물을 사용하고, 검출을 확인하기 위해 UBA7에 대한 교차 반응성 테스트를 수행하십시오.
• 재조합 토끼 단일클론 항체(Rabbit PolymAb®)로서 이 시약은 높은 로트 간 일관성을 제공하지만, 각 분석 및 샘플 유형에 대해 최적의 작업 희석 배율을 경험적으로 결정해야 합니다.

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