WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-ULK4 토끼 다클로날 항체 - Q96C45

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: ULK4 기능 및 국소화

• ULK4는 Unc-51 유사 키나제 패밀리에 속하는 유사 키나제로, FAM7C1 및 REC01035라고도 불리며, 촉매 키나제 활성이 없다는 것이 특징이며 대신 분자 어댑터로 기능합니다.
• 헤지호그 신호 전달 경로에서 ULK4는 원섬모(primary cilium)에서 작용하여 STK36 키나제와 GLI2 전사 인자 사이의 결합을 매개하여, GLI2 인산화와 SUFU 억제로부터의 후속 방출을 촉진하며, 이로써 GLI2의 핵 이동과 표적 유전자 활성화를 가능하게 합니다. 관련 참고문헌: PMID:38096226
• ULK4는 세포 돌기, 특히 섬모(cilium)에 국재하며, 이는 섬모 헤지호그 신호 전달에서의 역할과 일치합니다.
• 단백질 수준에서 ULK4 발현은 주로 뇌, 특히 GABA성 뉴런을 포함한 후분열 뉴런(postmitotic neurons)에서 검출되며, 성상세포(astrocytes)에서는 발견되지 않습니다.
• 이 단백질은 ATP 결합 도메인과 뉴클레오타이드 결합 능력을 가지고 있지만, 유사 키나제로 분류된다는 점은 비전형적인 뉴클레오타이드 이용을 시사합니다.
• 여러 개의 반복 영역을 포함하며, 단백질체학(proteomics) 동정에 의해 나타나듯이 인산화의 대상이 되어 조절 후번역 변형(post-translational modifications)을 시사합니다.
• GLI2 활성화에서 ULK4의 어댑터 기능은 적절한 헤지호그 신호 전달에 필수적이며, 이는 배아 발달, 줄기세포 유지 및 조직 재생을 조절합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 웨스턴 블로팅의 경우, ULK4의 높은 분자량(약 142 kDa)을 고려하여 효율적인 단백질 이동을 위해 낮은 백분율의 폴리아크릴아마이드 젤(예: 6-8%)을 사용하고 이동 시간을 연장하는 것을 고려하십시오.
• 면역형광법 또는 면역세포화학에서 ULK4는 섬모에 국재하므로, 섬모 구조를 보존하기 위해 고정 및 투과화 조건을 최적화하고, 아세틸화 튜불린(acetylated tubulin)이나 Arl13b와 같은 섬모 마커와의 공동 국재를 확인하십시오.
• 샘플 시스템에서 항체 특이성을 검증하기 위해 알려진 ULK4 발현 세포주 또는 조직(예: 뉴런 배양물 또는 뇌 조각)을 포함하고 가능한 경우 녹다운(knockdown) 또는 녹아웃(knockout) 대조군을 수행하십시오.
• 다클로날 항체이므로 로트(lot) 간 일관성이 달라질 수 있습니다. 각 새로운 로트에 대해 적정(titration)을 수행하고 모든 실험에 적절한 양성 및 음성 대조군을 포함할 것을 권장합니다.
• ELISA 어플리케이션의 경우, 반응성을 확인하고 최적 작업 희석 배율을 결정하기 위해 코팅용 재조합 면역원 또는 전장(full-length) ULK4 단백질을 사용하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 파트너

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