WB, IF-P, ELISA용 항-빈쿨린 단일클론 항체 - P18206

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 빈쿨린의 기능 및 위치

• 빈쿨린은 고도로 보존된 액틴 결합 단백질로, 인테그린과 카드헤린을 액틴 세포골격에 연결하며 세포-기질 접착과 세포 간 접착 모두에서 핵심적인 역할을 합니다.
• 메타빈쿨린(MV)으로 알려진 근육 특이적 아이소폼은 대체 스플라이싱에 의해 생성되며 추가 엑손을 포함합니다. 주로 심장근과 골격근에서 발현됩니다.
• 빈쿨린은 세포-기질 국소 접착, 세포 간 부착 접합부 및 핵주변 영역에 위치하며, 포도솜과 근초막과 같은 특수 구조에도 존재합니다.
• 이 단백질은 인산화, 아세틸화 및 팔미토일화 등 다양한 번역 후 변형을 받으며, 이러한 변형은 활성화, 단백질 상호작용 및 막 표적화를 조절합니다.
• 빈쿨린은 기계적 감지 센서로 작용합니다. 장력에 의해 유도된 구조 변화는 탈린과 F-액틴의 잠재적 결합 부위를 노출하여 접착 복합체를 강화합니다.
• 카드헤린-카테닌 복합체의 핵심 구성 요소인 빈쿨린은 E-카드헤린의 세포 표면 발현을 조절하고 부착 접합부에서 기계적 감지를 강화하여 조직 형태 형성과 항상성에 영향을 미칩니다.
• 접착과 기계적 신호 전달에서의 필수적인 역할과 일치하게, VCL의 돌연변이는 확장성 심근병증(CMD1W) 및 비대성 심근병증(CMH15)과 관련이 있습니다.
• 또한 빈쿨린은 세포 형태, 이동 및 침윤에 관여하며, 이는 포도솜으로의 모집과 라멜리포디아 동역학에 미치는 영향으로 확인됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 빈쿨린의 C-말단 영역(aa800-900)에 해당하는 합성 펩타이드입니다. 이 영역은 인간, 마우스 및 랫드 사이에서 보존되어 있어 보고된 교차 반응성을 설명합니다.
• 웨스턴 블롯팅에서 빈쿨린은 약 124 kDa의 겉보기 분자량으로 이동합니다. 적절한 겔 농도(예: 8% SDS-PAGE)를 사용하고 총 단백질 염색으로 전이 효율을 확인하십시오.
• 면역형광(IF-P)에서는 국소 접착과 부착 접합부의 구조를 보존할 수 있는 고정 및 투과화 조건을 고려하십시오(예: 4% PFA 처리 후 0.1% Triton X-100 처리). Paxillin 또는 F-액틴 마커와의 공동 염색으로 위치를 확인할 수 있습니다.
• ELISA를 수행할 때에는 면역원 펩타이드와 천연 단백질에 대해 항체를 적정하여 최적 농도를 결정하십시오. 복잡한 매트릭스에서 배경이 높게 관찰될 경우 교차 흡착을 평가할 수 있습니다.
• 빈쿨린은 어디에나 존재하는 단백질이므로 정량 분석을 위해 적절한 로딩 대조군(예: GAPDH, β-actin)을 포함하는 것이 필수적입니다.
• 근육 조직을 포함하는 연구에서는 이 항체가 빈쿨린과 메타빈쿨린 아이소폼을 모두 인식할 수 있다는 점에 유의하십시오. 후자는 약 150 kDa에서 약간 더 높은 위치로 이동합니다.

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