Anti-VPS4A Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UN37

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: VPS4A 기능 및 국소화

• 액포 단백질 분류 관련 단백질 4A(Vacuolar protein sorting-associated protein 4A, VPS4A)는 ATP 가수분해를 이용하여 ESCRT-III 복합체를 분해하는 AAA ATPase로, 엔도솜 경로의 막 절단 이벤트에 필수적입니다.
• 다소포체(MVB, multivesicular body) 형성 및 소포 내 소포(ILV, intraluminal vesicle) 분류에 필요합니다. VPS4A는 ESCRT-III 구성 요소를 세포질로 재분배하여 재사용하며, 엔도솜 크기, 원섬모(primary cilium) 조직, 후기(anaphase) 동안 핵막 봉합을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:33186545
• 세포분열의 절단(abscission) 단계에서 중심적인 역할을 합니다. 체크포인트 종료 시까지 중간체(midbody)에 ZFYVE19/ANCHR 및 CHMP4C에 의해 유지되며, VPS4A 방출은 막 절단을 유발합니다 (PubMed:24814515). 관련 참고문헌: PMID:24814515
• SDCBP, CD63 및 신데칸(syndecan)의 엑소좀 분비를 매개하여, ESCRT 기계를 엑소좀 생성과 연결합니다 (PubMed:22660413). 관련 참고문헌: PMID:22660413
• 정상적인 적혈구모세포(erythroblast) 세포분열 및 적혈구 생성에 중요하며. 돌연변이는 선천성 적혈무형성증 빈혈(congenital dyserythropoietic anemia)과 관련이 있습니다 (PubMed:33186543). 관련 참고문헌: PMID:33186543
• ESCRT 기계와 함께 VPS4A는, 외피 바이러스(예: HIV-1)에 의해 탈취되어 출아에 사용되는 위상학적으로 유사한 막 절단 이벤트에 참여합니다.
• 세포 내에서 후기 엔도솜 막, 중간체, 세포질 및 유사분열 방추체에 국소화합니다.
• 전반적으로 발현하며, 백내장, 유전성 용혈성 빈혈 및 지적 장애(UniProt 키워드에 나열됨)를 포함한 질병 변이와 연결됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 VPS4A의 잔기 1-120에 해당하는 N-말단 영역입니다. 이는 쥐 및 흰쥐 직동종 orthologs와의 교차 반응성을 용이하게 할 수 있습니다.
• 다클로날 항체로서 일반적으로 변성(WB) 및 네이티브(IHC-P, IF/ICC) 응용에서 강력한 검출을 제공합니다. 그러나 각 분석법에 대해 최적의 작업 희석 배율을 경험적으로 결정해야 합니다.
• 웨스턴 블로트의 경우 약 49 kDa의 예상 밴드가 관찰됩니다. VPS4A를 발현하는 전세포 또는 조직 용해물을 사용하십시오.
• IHC-P 및 IF/ICC의 경우 적절한 양성 대조군 및 음성 대조군으로 특이성을 검증하고, 항원 회복 또는 투과화(permeabilization) 조건을 최적화하십시오.
• ELISA의 경우 검증 후 샌드위치 분석을 구축하기 위해 이 항체를 다른 VPS4A 항체와 페어링하는 것을 고려하십시오.
• VPS4A는 세포분열 중 중간체에 국소화하므로, 후기 유사분열 단계에서 세포를 동기화하거나 중간체 구조를 농축하면 IF/ICC 검출이 향상될 수 있습니다.
• VPS4A는 전반적으로 발현하므로 특이성을 확인하기 위해 RNAi/CRISPR 실험에서 녹다운(knockdown) 또는 녹아웃(knockout) 효율을 확인하십시오.

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