APC Rabbit anti-Human NT5E/CD73 Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P21589

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: NT5E/CD73 기능 및 국소화

• 핵심 효소 활성: NT5E/CD73은 세포외 뉴클레오사이드 일인산을 뉴클레오사이드와 무기 인산으로 가수분해하는 5'-뉴클레오티다제로, 다른 기질보다 AMP를 강하게 선호합니다. 이 단계는 ATP로부터 면역 억제성 아데노신 생성 시 속도 제한 단계입니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:21933152 PMID:22997138 PMID:23142347 PMID:34403084
• 기질 특이성: AMP 외에도 이 효소는 IMP, UMP, GMP, CMP 및 여러 데옥시뉴클레오티드(dAMP, dCMP, dTMP)뿐만 아니라 NAD 및 NMN에도 작용할 수 있지만, 리보뉴클레오티드 일인산이 선호되는 기질입니다.
• 세포 내 국소화: CD73은 C-말단 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI) 앵커를 통해 세포막의 외부 소엽(outer leaflet)에 부착되며, 활성 부위가 세포외 공간에 위치하여 세포 주변 뉴클레오티드 풀을 조절합니다.
• 번역 후 수정: 이 단백질은 N-글리코실화되어 있으며 구조적으로 중요한 이황화 결합을 포함합니다. 막 부착은 전적으로 GPI 앵커에 의존합니다.
• 구조적 특징: 5'-뉴클레오티다제 패밀리에 속하며 촉매 활성을 위해 아연 및 기타 2가 금속 이온이 필요합니다. 이 분자는 세포 표면에서 호모이량체로 존재합니다.
• 질환 관련성: NT5E의 돌연변는 CD73 결핍에 의한 동맥 석회화(ACDC)라는 희귀 유전 질환과 관련이 있으며, 이 단백질은 종양학에서 두드러진 면역 관문(immune checkpoint) 표적입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 촉매 및 기질 결합 영역을 포함하는 전체 세포외 도메인(아미노산 27–547)을 포함합니다. 이 설계는 살아있는 세포에서 자연적이고 올바르게 접힌 CD73을 인식하는 데 유리합니다.
• 유세포분석의 경우, 관심 있는 세포 유형에 대한 최적의 염색 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(titration)하는 것이 좋습니다. 적절한 아이소타입 대조군(isotype controls)과 생존 염색(viability dyes)을 포함하십시오.
• 일부 시스템에서 CD73은 세포외 소포(extracellular vesicles)로 분리되거나 방출될 수 있습니다. 위음성 신호를 피하기 위해 샘플 준비 시 세포 손상을 최소화하십시오.
• 이 APC 접합체는 다중(multiplex) 패널에 적합합니다. 다른 형광체와 결합할 때 보상 설정(compensation settings)을 확인하십시오.

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