APC Rabbit anti-Mouse TNF-α 단일클론항체 (세포내 유세포 분석용) - P06804

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: TNF-α 기능 및 위치

• 종양괴사인자 (TNF-α)는 주로 활성화된 대식세포에 의해 분비되는 전염증성 사이토카인으로, 종양괴사인자 리간드 초가족 (TNFSF2)에 속합니다. 캐캑틴으로도 알려져 있으며, Tnf 유전자 (별칭 Tnfa, Tnfsf2)에 의해 암호화됩니다.
• TNF-α는 두 개의 서로 다른 수용체, TNFR1 (TNFRSF1A) 및 TNFR2 (TNFRSF1B)에 결합하여 세포사멸, 세포생존, 염증을 포함한 광범위한 세포 반응을 매개함으로써 생물학적 효과를 발휘합니다.
• 이 사이토카인은 급성기 반응의 주요 매개체이며, 직접적으로 또는 인터루킨-1 분비 자극을 통해 발열을 유도하는 내인성 발열물질로 기능할 수 있으며, 만성 질환 상태에서 악액질 발생에 관여합니다.
• 지방 조직에서 TNF-α는 인슐린 유도 IRS1 타이로신 인산화와 포도당 흡수를 억제하여 인슐린 저항성을 유도하고, GKAP42 단백질의 분해를 촉진하여 제2형 당뇨병의 병인에 기여합니다. 관련 참고문헌: PMID:25586176
• TNF-α는 파골세포 형성을 촉진하여 골 흡수를 매개함으로써 골 대사에 중요한 역할을 하며, 류마티스 관절염과 같은 상태에서 염증과 골 손실을 연결시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:32741026
• 단백질 분해적 절단에 의해 생성되는 TNF-α의 세포내 도메인(ICD)은 수용체 독립적 기능을 강조하며, 수지상 세포에서 IL-12 생산을 유도하는 신호 분자로 작용할 수 있습니다.
• 세포소기관 수준에서, TNF-α는 세포막에서 제II형 막관통 단백질(26 kDa)로 합성되며, TNF-α 전환 효소(TACE)에 의해 절단되어 가용성 17 kDa 사이토카인을 방출합니다. 이 단백질은 당화, 인산화, 미리스토일화, 이황화 결합 형성을 포함한 여러 번역 후 변형을 겪습니다.
• 세포독성 및 염증 역할 외에도, TNF-α는 IL-1β 및 IL-6와 시너지 효과를 내어 혈관생성을 자극하며, 특정 조건 하에서 세포 증식과 분화를 촉진하여 그 다면적 성질을 반영합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 마우스 TNF-α (NP_038721.1)의 아미노산 80-235에 해당하며, 성숙한 가용성 TNF-α 영역을 포함합니다. 이 설계는 세포외 도메인을 표적으로 하여 막결합형과 가용성 형태 모두를 인지할 가능성이 있습니다.
• 세포내 유세포 분석의 경우, 고정 및 투과화 프로토콜이 중요합니다. 사이토카인에 적합한 고정/투과화 키트를 사용한 표준 세포내 염색 프로토콜 사용을 고려하십시오.
• TNF-α는 분비 단백질이므로, 휴지기 세포는 세포내 수준이 낮을 수 있습니다. 강력한 검출을 위해, 단백질 수송 억제제(예: Brefeldin A 또는 Monensin) 존재 하에서 세포를 자극(예: PMA/이오노마이신 또는 LPS)하여 골지체에 TNF-α를 축적시키십시오.
• 특정 실험 시스템에 대한 최적 농도를 결정하기 위해 항체를 적정하는 것이 권장되며, 일반적으로 100만 세포당 0.5-5 µg 범위에서 시작합니다.
• 비자극 세포 및 동형대조군 항체를 포함한 적절한 대조군을 구동하여 비특이적 염색과 배경을 구분하십시오.
• 이 항체는 다색 유세포 분석 패널에 적합한 밝은 형광물질인 APC에 접합되어 있습니다. 다른 형광물질과 함께 사용할 때는 적절한 보상 설정을 확인하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브릿지

CamelBio는 IVD 원료에 대한 포괄적인 소싱 파트너로서, 진단 제조사, 실험실 및 연구 기관을 개념부터 임상까지 지원합니다. 이 APC 접합 항-마우스 TNF-α 항체는 민감한 유세포 분석 기반 분석법 및 면역분석 플랫폼 개발에 적합하며, CamelBio는 대량 조달, 맞춤형 접합 및 상보적 시약 소싱을 지원할 수 있습니다. 검증된 항체 쌍, 최적화된 단일클론/다클론 항체 및 부수적 시약에 대한 안정적인 접근을 통해, CamelBio는 염증 및 면역학 연구를 위한 공급망을 단순화합니다.