CAST Rabbit pAb for WB, ELISA - P20810

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Calpastatin 기능 및 위치

• Calpastatin (CAST)은 칼슘 의존성 시스테인 프로테아제(EC 3.4.22.-) 패밀리인 칼파인의 특이적인 내인성 억제제로, 세포골격 재구성, 신호 전달 및 세포사멸에 관여합니다.
• 칼파인에 강력하게 결합하여 억제함으로써, calpastatin은 근육 조직 내 프로테아제 활성을 조절하며, 사후 고기 연화 및 생체 세포 내 근육 단백질 분해 조절에 중요한 역할을 합니다.
• CAST 유전자는 광범위한 선택적 스플라이싱을 거쳐, 서로 다른 조직 분포와 억제 능력을 가진 여러 이소형을 생성합니다.
• Calpastatin은 각각 독립적으로 칼파인을 억제할 수 있는 네 개의 반복 억제 도메인(L-도메인)과 N-말단 도메인 L 및 C-말단 꼬리를 포함하며, 이 다중 반복 구조가 강력하고 협동적인 프로테아제 억제의 기초가 됩니다.
• 번역 후 변형에는 아세틸화, 인산화, 유비쿼틴화 및 이소펩타이드 결합 형성이 포함되며, 이는 단백질 안정성, 위치 및 억제 효율을 조절할 수 있습니다.
• Calpastatin 발현은 다양한 조직에서 검출되며, 정자(BS-17 성분으로서)에서 특징적으로 존재하고, 수장족저각화증과 질병 연관성이 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 CAST의 아미노산 510–610에 걸친 합성 펩타이드입니다; 항체 반응성은 이 영역의 이소형 사용 또는 번역 후 변형에 영향을 받을 수 있습니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 일차 항체 농도(예: 1:500–1:2000) 최적화 및 HeLa, HEK293 또는 골격근 리세이트와 같이 calpastatin이 내인적으로 발현되는 적절한 양성 대조군 사용을 고려하십시오.
• 이 항체는 마우스 및 래트와 교차 반응합니다; 이소형 변이로 인해 분자량이 약간 다를 수 있으므로, 해당 종에서 밴드 패턴을 확인하십시오.
• ELISA의 경우, 면역원 펩타이드 또는 전장 재조합 단백질에 대해 항체를 역가 측정하여 작업 농도를 설정하십시오; 적절한 차단 및 세척 단계를 사용하여 배경을 줄이십시오.
• 이것은 폴리클론 항체이므로, 여러 calpastatin 이소형을 검출할 수 있습니다; 관련 세포 모델에서 siRNA 녹다운 또는 과발현 실험을 통해 특이성을 확인하십시오.

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