절단된 PARP (Asp214) 토끼 다클론 항체 - Q921K2

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Poly [ADP-ribose] 중합효소의 기능과 위치

• 핵심 DNA 복구 효소: PARP1은 DNA 손상에 반응하여 표적 단백질의 폴리-ADP-리보실화(PARylation)를 매개하며, 단일 가닥 절단 부위에 복구 기계를 모집합니다.
• 세포사멸 마커: 세포사멸 과정에서 카스파제-3와 카스파제-7이 전장 PARP1(113 kDa)을 Asp214 위치에서 절단하면 89 kDa 단편이 생성됩니다. 이 단편은 DNA 절단 부위에 비가역적으로 결합하여 복구를 차단하고 프로그램화된 세포사멸을 촉진합니다.
• AIFM1 매개 세포사멸: 절단된 단편은 자가-PARylation을 거쳐 폴리-ADP-리보스 운반체로 작용하며, 미토콘드리아에서 핵으로 AIFM1의 전위를 유발하여 대규모 DNA 단편화를 유도합니다.
• 아세포 내 분포: 주로 핵(핵질과 핵인)에 위치하며 염색질과 결합합니다. 절단 후에는 단편이 세포질로 전위됩니다.
• 기능적 도메인: DNA 결합을 위한 징크-핑거 모티프, 자가변형 도메인, 그리고 NAD+를 기질로 사용하는 C-말단 촉매 도메인을 포함합니다.
• 유전자 패밀리: PARP 슈퍼패밀리에 속하며, Parp1(Adprt1)은 창립 멤버입니다. ADPRT, ARTD1, PPOL로도 알려져 있습니다.
• 번역 후 변형: 광범위한 자가-폴리-ADP-리보실화는 자체 활성을 조절하고 다른 복구 인자를 위한 스캐폴드 역할을 합니다. 카스파제에 의한 절단은 핵심 조절 과정입니다.
• 키워드: ADP-리보실화, 얼로스테릭 효소, 세포사멸, 염색체, 세포질, DNA 손상, DNA 복구, DNA 결합, 글리코실트랜스퍼라제, 면역, 선천성 면역, 이소펩타이드 결합, 금속 결합, NAD, 뉴클레오티딜트랜스퍼라제, 핵, 단백체학 동정, 반복서열, 전사, 전사 조절, 트랜스퍼라제, 아연, 징크-핑거

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 Asp214에 위치한 카스파제-3/7 절단 부위를 포함하는 마우스 PARP1의 201-300 잔기에 걸쳐 있습니다. 이 디자인은 세포사멸 실험에서 절단된 형태를 특이적으로 인식할 수 있게 합니다.
• 웨스턴 블롯팅(WB)의 경우 신호 증강을 위해 세포사멸 유도제(예: 스타우로스포린, 에토포시드)로 처리한 마우스 세포 또는 조직의 용해물을 사용하십시오. 전장 단백질은 약 113 kDa에서 이동하고, 절단된 단편은 약 89 kDa에서 나타납니다.
• ELISA의 경우 샌드위치 분석에서 이 항체를 포획 또는 검출 시약으로 사용하는 것을 고려하십시오. 팬-PARP 항체와 짝을 이루면 절단된 PARP와 총 PARP를 구분할 수 있습니다.
• 비세포사멸 조건에서 검출된 밴드가 사라지는 것을 확인하기 위해 PARP1 넉아웃 세포주나 카스파제 억제제 대조군을 사용하여 항체 특이성을 검증하십시오.
• 항체의 무결성을 유지하기 위해 반복적인 동결-해동 주기를 피하십시오. 4°C에서 단기 보관은 가능하지만, 장기 보관은 -20°C 이하에서 권장됩니다.

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