WB, IF/ICC, ELISA용 DiMethyl-Histone H3-K14 Rabbit pAb (Q16695/P68431)

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 히스톤 H3 기능 및 국재화

히스톤 H3는 크로마틴의 기본 반복 단위인 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소입니다. 뉴클레오솜은 DNA를 감싸고 응축하여 DNA를 템플릿으로 필요로 하는 세포 기계가 DNA에 접근하는 것을 제한합니다. 히스톤은 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에서 중심적인 역할을 합니다. DNA 접근성은 복잡한 번역 후 수정 세트("히스톤 코드") 및 뉴클레오솜 리모델링을 통해 조절됩니다.

이 항체는 사람 히스톤 H3의 리신 14 (K14) 이중메틸화 형태를 인식합니다. SWISS 액세션 번호 Q16695 (고환 세포에서 발현되는 히스톤 H3.1t)와 P68431 (정형 변형인 히스톤 H3.1)의 두 가지 주요 아이소폼이 포함됩니다. 두 아이소폼 모두 핵과 염색체에 국재화합니다.

리신 14는 히스톤 H3의 N-말단 꼬리에 있는 중요한 잔기로, 크로마틴 구조와 유전자 발현에 영향을 미치는 아세틸화 및 메틸화를 포함한 역동적인 번역 후 수정을 겪습니다. K14의 이중메틸화는 특정 전사 결과와 관련이 있으며 광범위한 후성유전적 조절 환경의 일부입니다.

관련 참고문헌: 핵심 뉴클레오솜 기능은 수많은 구조적 및 생화학적 연구에 의해 뒷받침됩니다. 수정 특정 인사이트는 다음을 참조하십시오: PMID:19608861, PMID:17194708.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 K14 주변의 합성 이중메틸화 펩타이드입니다. 이중메틸 특이성을 보장하려면 비수정 K14 펩타이드 또는 K14에서 단일-/삼중-메틸화가 있는 펩타이드에 대해 항체를 검증하는 것이 좋습니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 핵 추출물 분획을 사용하여 시작 희석 배율을 최적화할 수 있습니다. 예상되는 밴드는 약 15 kDa입니다. 가능한 경우 K14 데메틸라아제로 처리한 샘플에서 밴드 소멸을 확인하십시오.
• 면역형광(IF/ICC)의 경우 고정 및 투과화 조건이 에피토프 접근성에 영향을 미칠 수 있습니다. 메탄올 고정과 포름알데히드 고정을 테스트하고 펩타이드 경쟁 대조군을 포함하는 것이 좋습니다.
• ELISA의 경우, 수정 특이 결합을 검증하기 위해 면역원 펩타이드를 양성 대조군으로 사용하고 비수정 K14 펩타이드를 음성 대조군으로 사용하십시오.
• 이 항체는 히스톤 H3 N-말단 꼬리의 염기 서열 보존으로 인해 광범위한 종과 교차 반응할 것으로 예상됩니다. 적절한 양성 및 음성 대조군을 사용하여 관심 종에서 검증하십시오.

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