WB, IF/ICC, IP, ELISA용 DNMT1 토끼 다클로날 항체 - P26358

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: DNMT1 기능 및 국소화

• DNMT1 (DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1)은 DNA 복제 중 새로 합성된 가닥으로 DNA 메틸화 패턴을 복사하여 후성유전을 보장하는 주요 유지 메틸전이효소입니다 (PubMed:17200670, PubMed:21745816). 관련 참고문헌: PMID:17200670, PMID:21745816

• DNMT1은 반메틸화된 CpG 디뉴클레오타이드를 선호적으로 메틸화하며, 세포 분열 동안 메틸화 패턴의 충실한 전달에 필수적입니다 (PubMed:21745816, PubMed:26070743). 관련 참고문헌: PMID:21745816, PMID:26070743

• 복제 결합 유지 외에도, DNMT1은 G2 및 M기 동안 크로마틴과 결합하여 복제와 독립적으로 DNA 메틸화를 유지합니다 (PubMed:21745816). 관련 참고문헌: PMID:21745816

• DNMT1은 HDAC2와의 상호작용을 통해 전사 억제를 직접 매개하며, DNA 메틸화와 히스톤 수정을 조율합니다 (PubMed:10888872, PubMed:16357870). 관련 참고문헌: PMID:10888872, PMID:16357870

• 대장암 세포에서 DNMT1은 발암성 KRAS 구동 프로모터 과메틸화 및 종양 억제 유전자의 침묵을 매개하는 코억제제 복합체를 형성합니다 (PubMed:24623306). 또한 미분화 배아 줄기세포에서 유전자의 전사 억제 상태를 유지합니다 (PubMed:24623306). 관련 참고문헌: PMID:24623306

• DNMT1은 태아 조직, 심장, 신장, 태반 및 말초 혈액 단핵 세포에서 가장 높은 수준으로, 비장, 폐, 뇌, 소장, 결장, 간 및 골격근에서는 낮은 수준으로 발현됩니다. 아이소폼 2는 아이소폼 1보다 풍부하지 않습니다.

• DNMT1은 CXXC형 아연 집게 도메인을 포함하며 아세틸화, 인산화, 메틸화와 같은 조절적 번역 후 수정을 겪습니다.

• DNMT1은 핵에 국소화하며 염색체와 결합하여 유지 메틸화 및 전사 조절에서의 역할과 일치합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 DNMT1의 C-말단 영역 (aa 760-1109)을 포괄하며, 여기에는 촉매 메틸전이효소 도메인이 포함됩니다. 이 설계는 활성 부위를 타겟팅하여 전장 DNMT1의 검출을 향상시킬 수 있습니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 약 183 kDa에서 밴드가 예상됩니다. 낮은 백분율(예: 6–8%)의 SDS-PAGE 젤을 사용하고 이동 시간을 연장하면 이 고분자량 단백질을 분해하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• DNMT1 발현 수준은 세포 유형과 조직에 따라 다릅니다. 적절한 양성 대조군(예: HeLa, HEK293) 및 음성 대조군을 사용하여 특정 샘플 시스템에서 항체 성능을 검증하십시오.
• 면역침전의 경우 항체 농도를 최적화하고 ~50 kDa에서 IgG 중쇄 간섭을 줄이기 위해 비드와의 가교 결합을 고려하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우 핵 항원 접근을 위해 핵 투과화(예: Triton X-100 사용) 및 적절한 고정이 필요합니다. 핵 마커와 이중 염색을 수행하면 국소화를 확인할 수 있습니다.

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